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【佳學基因檢測】CRISPR/CAS9基因編輯系統(tǒng)糾正基因檢測發(fā)現(xiàn)的致病性因子XIII缺陷突變

根據(jù)青春期性發(fā)育異常解析采用基因檢測進行早期發(fā)現(xiàn)的標準,國際著名基因檢測科學性證據(jù)雜志《Blood Coagul Fibrinolysis》在第.?2022 Apr 1;33(3):153-158.期發(fā)表了一篇標題為《CRISPR/CAS9基因編輯系統(tǒng)

佳學基因檢測】CRISPR/CAS9基因編輯系統(tǒng)糾正基因檢測發(fā)現(xiàn)的致病性因子XIII缺陷突變


男性及女性生殖障礙的診斷圖譜及解析基因檢測靶向藥物分析

根據(jù)青春期性發(fā)育異常解析采用基因檢測進行早期發(fā)現(xiàn)的標準,國際著名基因檢測科學性證據(jù)雜志《Blood Coagul Fibrinolysis》在第. 2022 Apr 1;33(3):153-158.期發(fā)表了一篇標題為《CRISPR/CAS9基因編輯系統(tǒng)糾正基因檢測發(fā)現(xiàn)的致病性因子XIII缺陷突變》的國際前沿研究總結(jié)文章。該基因領域的臨床應用研究由Akbar Dorgalaleh, Jafar Kiani, Farhad Zaker , Majid Safa , 完成。


基因信息數(shù)據(jù)庫索引號:

臨床數(shù)據(jù)代碼: 35221320和 doi: 10.1097/MBC.0000000000001126. Epub 2022 Feb 25.

基因解碼研究關鍵詞:

基因檢測,因子XIII, FXIII, 缺乏, 嚴重先天性出血疾病, 臨床表現(xiàn), 臍帶出血, 顱內(nèi)出血, 反復性流產(chǎn)


國際基因解碼證據(jù)鏈條標簽:

Keywords:Factor XIII,FXIII,deficiency,severe congenital bleeding disorders, clinical manifestations, umbilical cord bleeding, intracranial haemorrhage,recurrent miscarriages


基因檢測臨床研究與應用結(jié)果介紹:

因子XIII(FXIII)缺乏癥是最嚴重的先天性出血性疾病之一,估計發(fā)病率為百萬分之一。嚴重FXIII缺乏癥患者表現(xiàn)出廣泛的臨床表現(xiàn),包括臍帶出血、顱內(nèi)出血和反復性流產(chǎn)。由于危及生命的出血率很高,從診斷時起就必須進行初級預防。雖然替代療法是最常見的治療選擇,但基因療法仍是唯一的治療選擇。在本研究中,新經(jīng)濟條件下婚戀習慣與生殖能力的基因檢測基因解碼全面性分析課題組評估了聚集的規(guī)則間隔短回文重復序列-CRISPR相關蛋白9(CRISPR/Cas9)系統(tǒng)在糾正最常見的FXIII致病突變(c.562 T>c)中的功效。從一名FXIII缺乏的年輕患者的皮膚活檢中獲取真皮成纖維細胞。Sanger測序用于確認患者和收獲的成纖維細胞中是否存在c.562 T>c突變。PX459載體用BbsI限制性內(nèi)切酶消化,在退火和連接兩個接近PAM(NGG)序列的20 bp導向RNA(g-RNAs)后,構(gòu)建的載體在大腸桿菌Top 10中擴增。通過核子轉(zhuǎn)染裝置進行轉(zhuǎn)染,在嘌呤霉素選擇和潛在轉(zhuǎn)染菌落的連續(xù)稀釋后進行DNA提取。使用50 bp的模板寡核苷酸幫助同源修復,以糾正潛在突變和同義突變,作為內(nèi)部對照。突變位點附近的同義突變(AAT-to-ACT)被用作內(nèi)部對照。Sanger測序是為了檢查基因的正確性。在患者的原代成纖維細胞中檢測到純合狀態(tài)的c.562 T>c突變,在正常個體中確認了野生型等位基因。菌落PCR和測序顯示設計的gRNAs克隆成功。在患者轉(zhuǎn)染的真皮成纖維細胞中,檢測到的突變從純合子突變狀態(tài)(c.562 T>c)糾正為純合子野生型。作為內(nèi)部對照,對照突變也以雜合子的方式在相同的成纖維細胞中得到糾正。研究結(jié)果表明,CRISPR/CAS9基因編輯系統(tǒng)是糾正先天性FXIII缺陷患者轉(zhuǎn)染的成纖維細胞點突變的有效工具,是一種新的、潛在的治療選擇。


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