【佳學(xué)基因檢測】卵巢早衰基因檢測可以找到發(fā)病原因嗎?
卵巢早衰基因檢測現(xiàn)在是什么水平?
早發(fā)性卵巢功能不全(POI),以卵巢功能停止為特征。根據(jù)《生殖科基因病的發(fā)生率及其基因原因》,卵巢早衰影響3.7%的40歲以下女性,并且仍是女性不孕的常見原因。POI的病因具有高度異質(zhì)性,在不同的人身上具有不同的原因。其發(fā)病原因有自發(fā)的遺傳缺陷或自身免疫性疾病、感染或醫(yī)源性因素引起。這不同的原因具有不同的遺傳性和治療前景。即使被醫(yī)生診斷為特發(fā)性POI,基因解碼堅(jiān)持認(rèn)為它們?nèi)匀痪哂衅鋬?nèi)在的基因突變?cè)?。因此,確定POI的分子基礎(chǔ)對(duì)于個(gè)性化的治療靶點(diǎn)(如體外激活)、指導(dǎo)遺傳咨詢、妊娠計(jì)劃至關(guān)重要。
高通量測序技術(shù)的賊新進(jìn)展尤其是基因解碼技術(shù)日漸普及的應(yīng)用極大地?cái)U(kuò)展了對(duì)POI發(fā)病的基因原因的查找,目前已有約90個(gè)基因與孤立性或綜合征性POI相關(guān)。然而,這些已知基因中的變異僅占患者的一小部分,表明POI具有高度遺傳異質(zhì)性,基于數(shù)據(jù)庫比對(duì)的基因檢測方法具有一定的局限性。此外,由于相對(duì)于人群的多樣性來講,已經(jīng)做過的基因檢測的個(gè)體數(shù)量上仍然不足,阻礙了統(tǒng)計(jì)上穩(wěn)健的單基因關(guān)聯(lián)的建立和新致病基因的識(shí)別。佳學(xué)基因在引通過分原大量的檢測數(shù)據(jù),揭示基因測序和基因解碼技術(shù)不斷拓展基因突變的數(shù)量和范圍,從而增加基因檢測的正確性和全面性。
卵巢早衰基因檢測如何拓展受檢人群,從而增加檢測分析范圍?
佳學(xué)基因從國際生殖基因檢測聯(lián)盟獲得了1,790名在血緣關(guān)系互不相關(guān)的早發(fā)卵巢衰竭(POI)患者進(jìn)行基因測序數(shù)據(jù)分析及基因解碼分析。POI的診斷采用歐洲人類生殖與胚胎學(xué)會(huì)(ESHRE)的指南,需滿足下列條件:(1)在40歲前至少4個(gè)月的少經(jīng)或閉經(jīng),(2)兩次間隔超過4周的促卵泡激素(FSH)水平升高(>25 IU L−1)。排除具有染色體異常及其他已知的非遺傳原因(包括自身免疫疾病、卵巢手術(shù)、化療和放療)的患者。賊終包括1,030名不相關(guān)的POI患者,其中包括120例原發(fā)性閉經(jīng)(PA)和910例繼發(fā)性閉經(jīng)(SA)(見圖1)。在SA患者中,平均發(fā)生少經(jīng)或閉經(jīng)的年齡為22.2歲??傆?jì)對(duì)1,030例病例進(jìn)行了DNA提取和全外顯子組測序(WES)。變異位點(diǎn)的識(shí)別和注釋按照方法描述進(jìn)行。使用多種序列質(zhì)量參數(shù)去除假陽性,同時(shí)過濾掉在gnomAD數(shù)據(jù)庫的公共對(duì)照組或華彪項(xiàng)目的內(nèi)部對(duì)照組中的常見變異(賊小等位基因頻率(MAF)> 0.01)。
篩選由可能的遺傳缺陷導(dǎo)致的特發(fā)性早發(fā)卵巢衰竭(POI)隊(duì)列的流程圖。
總共招募了1,790名早發(fā)卵巢衰竭(POI)患者進(jìn)行初步評(píng)估,每位參與者進(jìn)行了血清檢測、盆腔超聲和病歷評(píng)估。在符合納入標(biāo)準(zhǔn)的1,030名患者中進(jìn)行了全外顯子組測序(WES)。*納入標(biāo)準(zhǔn)基于2016年ESHRE POI指南。E2,雌激素。
卵巢早衰基因檢測如查沒有分析這幾個(gè)基因,為什么說檢測分析不全面?
基因檢測數(shù)據(jù)庫中,首先在95個(gè)基因中發(fā)現(xiàn)了致病性突變或者證明這些基因與卵巢早衰有關(guān)。卵巢早衰基因檢測的基礎(chǔ)包應(yīng)包括這95個(gè)基因。致病基因鑒定基因檢測分析首先量化了95個(gè)特征明確的POI致病基因中致病變體對(duì)POI的貢獻(xiàn)率(定義為病例百分比)。根據(jù)美國醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)與基因組學(xué)學(xué)院(ACMG)的指南或ClinVar,首先對(duì)這些已知致病基因中的變體致病性進(jìn)行了人工審查評(píng)估。在貢獻(xiàn)分析中,優(yōu)先考慮了致病性(P)和可能致病性(LP)變體。由于功能研究可能通過引入PS3證據(jù)將意義不明確的變體(VUSs)升級(jí)為P/LP,基因解碼對(duì)參與同源重組(HR)修復(fù)(BLM、HFM1、MCM8、MCM9、MSH4和RECQL4)和卵泡發(fā)生(NR5A1)的7個(gè)常見POI致病基因中的75個(gè)VUSs進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。其中,55個(gè)基因突變被證實(shí)為有害,佳學(xué)基因解碼正是采用這些創(chuàng)新方法,增加了致病基因突變的檢出率和檢測分析的有效性。其中38個(gè)從VUS升級(jí)為LP。通過T克隆或10x Genomics方法,確認(rèn)了同一基因中發(fā)生在同一個(gè)個(gè)體的兩個(gè)P/LP雜合突變處于反式。綜合數(shù)據(jù)(包括在已知基因中檢測到的4,730個(gè)變體的分布)如圖所示
(擴(kuò)展數(shù)據(jù)圖)。