【佳學(xué)基因檢測】分子診斷與基因檢測中各種不同的PCR技術(shù)
1.遞減PCR(touchdown PCR):前幾循環(huán)溫度逐漸下降。
2.逆轉(zhuǎn)錄PCR(RT-PCR):以由mRNA逆轉(zhuǎn)錄而來的cDNA 為模板,也因為是從表現(xiàn)型基因來進行增量的,由此產(chǎn)生出來的cDNA 產(chǎn)物不帶有內(nèi)含子(基因中不具意義的段落),常應(yīng)用于分子克隆技術(shù)。
3.熱啟動PCR(hotstart PCR):以高熱激活型核酸聚合酶進行反應(yīng),減少非專一性產(chǎn)物。
4.巢式PCR(nested PCR):先用低特異性引物擴增幾個循環(huán)以增加模板數(shù)量,再用高特異性引物擴增。
5.多重PCR(multiplex PCR):在同一個管中使用多組引物。
6.復(fù)原條件PCR(reconditioning PCR):PCR 產(chǎn)物稀釋 10 倍后重新放入原濃度的引物和dNTP 等循環(huán) 3 次,以消除產(chǎn)物中的異二聚體。
7.dsRNA 合成(dsRNA replicator):合并使用high-fidelity DNA polymersae、T7RNA聚合酶與Phi6 RNA replicase;從雙股 DNA轉(zhuǎn)錄為對應(yīng)的雙股RNA(dsRNA)??蓱?yīng)用于RNAi實驗操作。
8.COLD-PCR (co-amplification at lower denaturation temperature PCR):用以檢測突變或特殊等位基因的PCR 應(yīng)用技術(shù)。
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