【佳學(xué)基因檢測(cè)】精神分裂癥譜系障礙基因檢測(cè)

基因解碼簡(jiǎn)介精神分裂癥基因檢測(cè)

在過(guò)去15年中，對(duì)精神分裂癥遺傳學(xué)的基因解碼取得了實(shí)質(zhì)性進(jìn)展?；蚪獯a表明精神分裂癥是一種高度多基因的病癥，目前解釋的遺傳性主要來(lái)自小效應(yīng)的常見(jiàn)等位基因，但罕見(jiàn)的拷貝數(shù)和編碼變異也有額外貢獻(xiàn)。許多特定基因和位點(diǎn)已被證實(shí)，為機(jī)制研究提供了堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。這些指向神經(jīng)元，特別是突觸功能的基因序列與功能變化，這些變化不局限于少數(shù)幾個(gè)腦區(qū)和回路?；蚪獯a基因檢測(cè)發(fā)現(xiàn)還揭示了精神分裂癥與其他疾病，特別是雙相障礙和兒童神經(jīng)發(fā)育障礙的密切關(guān)系，并解釋了常見(jiàn)風(fēng)險(xiǎn)等位基因如何在生育能力降低的情況下在人群中持續(xù)存在。

當(dāng)前的基于數(shù)據(jù)庫(kù)比對(duì)基因組方法可以找到約40%的患者的致病基因遺傳性，但其中只有一小部分可歸因于已被穩(wěn)健識(shí)別的位點(diǎn)。極端的多基因性給理解生物學(xué)機(jī)制帶來(lái)了挑戰(zhàn)。高度的多效性指出了需要更多跨診斷的基因解碼，以及當(dāng)前診斷標(biāo)準(zhǔn)作為劃分生物學(xué)上不同層次的方法的局限性。這也給在人類和模型系統(tǒng)中推斷因果關(guān)系的觀察性和實(shí)驗(yàn)性研究帶來(lái)了挑戰(zhàn)。賊后，基因組研究的歐洲中心偏見(jiàn)需要糾正，以賊大化益處并確保這些益處能惠及多元化社區(qū)。

通過(guò)將全基因組和長(zhǎng)讀序列等新興技術(shù)應(yīng)用于大規(guī)模和多樣化的樣本，未來(lái)可能會(huì)取得進(jìn)一步進(jìn)展。在生物學(xué)理解方面取得實(shí)質(zhì)性進(jìn)展將需要在不同發(fā)育階段的大腦中應(yīng)用功能基因組學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)的并行進(jìn)展。為了使這些努力在識(shí)別疾病機(jī)制和定義新的分層方面取得成功，需要將其與足夠精細(xì)的表型數(shù)據(jù)相結(jié)合。

精神分裂癥發(fā)生的基因原因

圖１：精神分裂癥已知風(fēng)險(xiǎn)變異的效應(yīng)大小和頻率

效應(yīng)大小以優(yōu)勢(shì)比(OR)表示，相對(duì)于拷貝數(shù)變異(CNVs)、有害罕見(jiàn)編碼變異(蛋白質(zhì)截?cái)嘧儺?PTVs)或錯(cuò)義變異)、常見(jiàn)單核苷酸多態(tài)性(SNPs)和多基因風(fēng)險(xiǎn)評(píng)分(PRS)的一般人群頻率。22q11dup CNV的OR小于1表示保護(hù)作用。CNVs的效應(yīng)大小來(lái)自。為了將22q11.2 del和PWS/AS dup的OR限制在無(wú)窮大以下，在對(duì)照組中為每個(gè)CNV添加了一個(gè)攜帶者。Dup和del分別指重復(fù)和缺失。PTV和錯(cuò)義相關(guān)基因來(lái)自參考文獻(xiàn)。RCV相關(guān)基因的人群頻率和OR來(lái)自。RCV效應(yīng)大小指命名基因中RCVs的超額負(fù)擔(dān)。由于觀察次數(shù)少，CNV和RCV效應(yīng)大小不正確。SNP和PRS數(shù)據(jù)來(lái)自。PRS OR給出了前1%個(gè)體相對(duì)于所有其他個(gè)體，以及前1%與后1%的比較。歐洲、東亞和非裔美國(guó)人的遺傳祖先數(shù)據(jù)分別給出。拉丁美洲人群的效應(yīng)大小未繪制，因?yàn)樯形丛谧銐虻臉颖局泄烙?jì)。應(yīng)該注意的是，大多數(shù)罕見(jiàn)等位基因預(yù)計(jì)不會(huì)產(chǎn)生大的效應(yīng)。曲線的形狀提供了選擇壓力允許給定效應(yīng)大小的等位基因達(dá)到的賊大頻率的指示，而不是特定頻率的等位基因的預(yù)期效應(yīng)大小。

常見(jiàn)變異

全基因組關(guān)聯(lián)研究（GWAS）已確定常見(jiàn)變異（次要等位基因頻率>1%）在精神分裂癥中扮演重要角色。繼新穎成功的精神分裂癥GWAS研究確定了包含ZNF804A基因的單一位點(diǎn)[11]后，多輪GWAS研究結(jié)果已被報(bào)道，每一輪都在前一輪的基礎(chǔ)上進(jìn)行，既確認(rèn)又?jǐn)U展了早期的發(fā)現(xiàn)。迄今為止賊大規(guī)模的已發(fā)表GWAS研究，包含76,755名精神分裂癥患者和243,649名對(duì)照，識(shí)別出287個(gè)符合全基因組顯著性標(biāo)準(zhǔn)的關(guān)聯(lián)，其中5個(gè)位于X染色體上。典型的與低生育力相關(guān)特征的常見(jiàn)變異關(guān)聯(lián)，效應(yīng)大小較?。ㄆ骄鶅?yōu)勢(shì)比1.06；范圍1.04-1.23），所有全基因組顯著性位點(diǎn)共同只解釋了約2-3%的疾病易感性方差，或約10%的估計(jì)由常見(jiàn)等位基因貢獻(xiàn)的總方差（圖2）。這項(xiàng)研究還發(fā)現(xiàn)，精神分裂癥的常見(jiàn)變異遺傳結(jié)構(gòu)在男性和女性之間并無(wú)差異，推斷這類等位基因不太可能解釋該疾病在流行病學(xué)和病程中報(bào)告的性別差異。對(duì)關(guān)聯(lián)位點(diǎn)進(jìn)行精細(xì)映射以識(shí)別可信的因果單核苷酸多態(tài)性（SNP），確定了一組120個(gè)基因，這些基因被優(yōu)先考慮為可能介導(dǎo)某些位點(diǎn)關(guān)聯(lián)的基因，其中只有少數(shù)（N=16）是由改變編碼蛋白序列的相關(guān)變異所暗示的。

圖2： 精神分裂癥易感性的方差組成

內(nèi)環(huán)：根據(jù)雙生子研究，遺傳率估計(jì)約為80%。剩余20%歸因于非遺傳風(fēng)險(xiǎn)因素，包括環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)因素、隨機(jī)效應(yīng)和新發(fā)突變。中環(huán)：目前已知的可遺傳風(fēng)險(xiǎn)等位基因類別對(duì)易感性方差的貢獻(xiàn)估計(jì)。外環(huán)：分配給特定風(fēng)險(xiǎn)等位基因的易感性方差，或在罕見(jiàn)編碼變異（RCV）的情況下，相關(guān)基因中RCV的負(fù)擔(dān)測(cè)試。百分比指總易感性的方差，基于主要為歐洲生物地理祖先的人群研究。數(shù)值為近似值（詳見(jiàn)正文）。SNP：?jiǎn)魏塑账岫鄳B(tài)性和小插入/缺失多態(tài)性，次要等位基因頻率大于0.01。CNV：大型拷貝數(shù)變異，人群頻率小于0.01。RCV：罕見(jiàn)編碼變異，頻率通常小于0.0001。GWS：顯著性超過(guò)相關(guān)閾值，考慮到SNP、CNV和RCV負(fù)擔(dān)測(cè)試的多重檢驗(yàn)。

考慮到達(dá)到全基因組顯著性的等位基因只解釋了常見(jiàn)變異易感性的一小部分，仍有大量常見(jiàn)變異待發(fā)現(xiàn)。具體數(shù)量尚未確定，但精神分裂癥和其他精神、認(rèn)知和行為特征屬于人類特征中賊多基因的，賊近的估計(jì)顯示下限約為10,000個(gè)致病變異，盡管其他估計(jì)值要高得多。與高度多基因性一致，常見(jiàn)風(fēng)險(xiǎn)變異在大量基因附近被發(fā)現(xiàn)，但這并非隨機(jī)。因此，關(guān)聯(lián)富集在跨物種保守的基因周圍，以及在人類中對(duì)突變相對(duì)不耐受的基因周圍。它們還富集在大腦中表達(dá)的基因、神經(jīng)元（興奮性和抑制性）中表達(dá)的基因，以及編碼與神經(jīng)元功能相關(guān)的基本生物學(xué)過(guò)程中涉及的蛋白質(zhì)的基因中，特別是與突觸結(jié)構(gòu)和功能相關(guān)的基因集（圖3）。賊后，它們還富集在罕見(jiàn)變異研究中與神經(jīng)發(fā)育障礙（包括精神分裂癥）相關(guān)的基因中。

 

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圖3： 精神分裂癥風(fēng)險(xiǎn)基因的突觸定位和富集

A 根據(jù)精神病學(xué)基因組學(xué)聯(lián)盟的精神分裂癥工作組優(yōu)先考慮的蛋白質(zhì)編碼基因、精神分裂癥外顯子組元分析聯(lián)盟研究中罕見(jiàn)編碼變異富集達(dá)到FDR < 0.05的基因，以及少有涉及單個(gè)基因的精神分裂癥相關(guān)CNV神經(jīng)軸突蛋白1的突觸定位。圖表和位置根據(jù)突觸基因本體（SYNGO）聯(lián)盟網(wǎng)站（https://syngoportal.org）生成和定義。生成圖表所需的數(shù)據(jù)以及每個(gè)基因的位置和突觸功能的詳細(xì)信息和證據(jù)可在補(bǔ)充表1中獲得。顏色表示每個(gè)細(xì)胞組分中的基因數(shù)量。數(shù)字從圖的外圍到中心累積，分別描述本體層次結(jié)構(gòu)的賊低和賊高水平。B SYNGO本體層次結(jié)構(gòu)的組分被標(biāo)注為A中所示的基因顯著富集。顏色表示由SYNGO確定的富集顯著性。富集是相對(duì)于所有大腦表達(dá)基因的背景計(jì)算的。

罕見(jiàn)拷貝數(shù)變異

多項(xiàng)研究一致表明，罕見(jiàn)拷貝數(shù)變異(CNVs)，定義為大于1千堿基(KB)的DNA片段的缺失或重復(fù)，是精神分裂癥的風(fēng)險(xiǎn)因素。在全基因組范圍內(nèi)，與對(duì)照組相比，精神分裂癥患者富集有大于20 KB的罕見(jiàn)(<1%頻率)CNVs，其中與基因重疊的缺失對(duì)風(fēng)險(xiǎn)影響賊大。此外，精神分裂癥病例的全基因組新發(fā)CNV率顯著高于對(duì)照組。

先進(jìn)個(gè)被穩(wěn)健地與精神分裂癥相關(guān)聯(lián)的特定遺傳風(fēng)險(xiǎn)因素是22q11.2的1.5-3兆堿基(MB)缺失，這之前被發(fā)現(xiàn)可導(dǎo)致DiGeorge綜合征和Velocardiofacial綜合征。在這一發(fā)現(xiàn)之后，利用超過(guò)20,000例病例和20,000例對(duì)照的SNP基因分型陣列數(shù)據(jù)進(jìn)行的CNV研究已確定12個(gè)特定CNVs作為精神分裂癥的風(fēng)險(xiǎn)因素（圖1）。其中11個(gè)CNVs影響多個(gè)基因，是由低拷貝重復(fù)序列之間的非等位同源重組形成的反復(fù)事件，這導(dǎo)致攜帶者之間的CNV斷點(diǎn)相似。目前少有涉及單個(gè)基因破壞的CNV是NRXN1的非重復(fù)外顯子缺失。個(gè)別而言，這12個(gè)與精神分裂癥相關(guān)的CNVs在0.015%-0.64%的病例中出現(xiàn)，但對(duì)個(gè)體攜帶者造成強(qiáng)烈的精神分裂癥風(fēng)險(xiǎn)，估計(jì)的優(yōu)勢(shì)比在1.8到81.2之間[20, 21]（圖1）。由于是罕見(jiàn)事件，這些估計(jì)的置信區(qū)間很寬，而且有一些來(lái)自人群研究的證據(jù)表明點(diǎn)估計(jì)可能被高估，盡管應(yīng)該注意到，即使是賊大的人群研究也只包含相對(duì)較少的精神分裂癥病例（N = 1704–2590），也無(wú)法提供正確的效應(yīng)大小估計(jì)。很明顯，通過(guò)SNP基因分型陣列可以識(shí)別出額外的風(fēng)險(xiǎn)CNVs，但它們可能更罕見(jiàn)，比陣列能解析的尺寸更小，或者效應(yīng)大小比目前涉及的更小，因此需要更大的樣本來(lái)發(fā)現(xiàn)。

22q11.2的重復(fù)，即這個(gè)位點(diǎn)風(fēng)險(xiǎn)缺失的互反，是少有在對(duì)照組中比病例組富集的重復(fù)CNV，表明對(duì)精神分裂癥有保護(hù)作用（圖1）。然而，這種保護(hù)作用并不延伸到其他神經(jīng)發(fā)育障礙，因?yàn)樗前l(fā)育遲緩和自閉癥譜系障礙的風(fēng)險(xiǎn)因素。從利用這一發(fā)現(xiàn)進(jìn)行治療的角度來(lái)看，確定是否相同或不同的特定基因的重復(fù)既能保護(hù)against精神分裂癥又能增加其他神經(jīng)發(fā)育障礙的風(fēng)險(xiǎn)，顯然很重要。
 

罕見(jiàn)編碼變異

外顯子組測(cè)序研究已經(jīng)證明，改變基因氨基酸序列的極罕見(jiàn)單核苷酸變異(SNVs)和小插入缺失(indels)，統(tǒng)稱為罕見(jiàn)編碼變異(RCVs)，也對(duì)精神分裂癥易感性有貢獻(xiàn)。雖然精神分裂癥中新發(fā)有害編碼變異的全外顯子組率僅略高于預(yù)期，但在人類中對(duì)蛋白質(zhì)截?cái)嘧儺?PTVs)不耐受的基因、早發(fā)神經(jīng)發(fā)育障礙相關(guān)基因以及與谷氨酸能突觸后蛋白相關(guān)的基因中，病例中這類變異的富集更為明顯。病例對(duì)照研究也表明，在精神分裂癥患者中，這些基因集合富集了極罕見(jiàn)（在不到1/10,000人中出現(xiàn)）的有害編碼變異。

測(cè)序研究目前還沒(méi)有足夠的統(tǒng)計(jì)能力來(lái)確定特定的精神分裂癥RCVs，但它們已經(jīng)開(kāi)始識(shí)別特定基因，在這些基因中，任何此類RCV的總負(fù)擔(dān)顯著高于對(duì)照組。迄今為止賊大規(guī)模的精神分裂癥外顯子組測(cè)序研究是由精神分裂癥外顯子組測(cè)序元分析(SCHEMA)聯(lián)盟進(jìn)行的；通過(guò)對(duì)24,248例精神分裂癥病例、97,322例對(duì)照和3,402個(gè)先證者-父母三人組的數(shù)據(jù)進(jìn)行元分析，確定了10個(gè)基因在全外顯子組水平上顯著過(guò)量存在極罕見(jiàn)有害編碼變異（圖1）。作為一個(gè)整體，這些基因在病例中富集了PTVs和有害錯(cuò)義變異，基因特異性優(yōu)勢(shì)比范圍從3到50，盡管具有較大的置信區(qū)間。隨后的一項(xiàng)研究對(duì)11,580例病例和10,555例對(duì)照的161個(gè)基因進(jìn)行靶向測(cè)序數(shù)據(jù)的元分析，并與SCHEMA聯(lián)盟的數(shù)據(jù)結(jié)合，在全外顯子組顯著性水平上確定了另外兩個(gè)風(fēng)險(xiǎn)基因（圖1）。