【佳學基因檢測】基因檢測測序技術金標準:Sanger法一代測序
基因測序技術始于1977年,sanger發(fā)明的DNA雙脫氧末端終止測序法拉開了序幕。Sanger在1958年和1980年因為胰島素測序和DNA測序而兩度獲得諾貝爾化學獎,是第四位兩度獲得諾貝爾獎以及少有獲得兩次諾貝爾化學獎的人。
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Sanger測序
Sanger測序采用四個雙脫氧核糖核酸(ddNTP)加入到正在合成的鏈上,由于雙脫氧核糖核酸少了一個氧原子,一旦被加入到DNA鏈上,反應即終止。
通過構建四個反應體系,加入AGCT四種雙脫氧核糖核酸,同時調(diào)節(jié)脫氧核糖核酸(dNTP)和ddNTP的相對濃度,可以使反應擴增得到幾百至上千堿基的終止產(chǎn)物。
隨后通過凝膠電泳對產(chǎn)物進行分離,分為四個泳道,每個泳道對應一種堿基,然后讀取條帶顯影結果。
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該方法因正確率高,被稱為基因檢測的金標準,但是耗時長,成本高。
2001年人類基因組計劃就是采用sanger測序完成的,從1990年人類基因組計劃建立開始,全球的科學家歷時11年耗資30億美元完成。
進入21世紀后,隨著物理及化學技術的發(fā)展,開始采用相同激發(fā)波長但不同發(fā)射波長的熒光集團來標記ddNTP,ATGC對應不同的熒光基團產(chǎn)生不同顏色的光被計算機讀取,測序的速度和效率大大提高。
(責任編輯:佳學基因)