極長(zhǎng)鏈?；o酶A脫氫酶缺乏癥基因要檢測(cè)是英文疾病名稱(chēng)為very long chain acyl-CoA dehydrogenase deficiency, 簡(jiǎn)寫(xiě)為VLCADD，OMIM代碼為201475的疾病的各種基因檢測(cè)的總稱(chēng)?；蚪獯a表明，該病是)是由于細(xì)胞線粒體內(nèi)脂肪酸β氧化中的關(guān)鍵酶極長(zhǎng)鏈?；o酶A脫氫酶基因發(fā)生不同類(lèi)型的突變后所引起的一咱常染色體隱性遺傳疾病，是一種較罕見(jiàn)的遺傳代謝性疾病。近年串聯(lián)質(zhì)譜(MS/MS)和氣相質(zhì)譜（GC/MS)的運(yùn)用對(duì)于該病的診斷起到很大的作用。
 

新生兒疾病篩查顯示各國(guó)發(fā)病率有明顯差異：澳大利亞估計(jì)為1/31 500，德國(guó)為1/125000，英國(guó)為1/42500。Lindner等統(tǒng)計(jì)澳大利亞、德國(guó)和美國(guó)約5 250 000新生兒篩查資料認(rèn)為VLCADD發(fā)生率約為1/85000.上海市兒科醫(yī)學(xué)研究所對(duì)約50萬(wàn)新生兒篩查的串聯(lián)質(zhì)譜遺傳代謝病篩查并未發(fā)現(xiàn)VLCADD患者；Shigematsu Y等對(duì)日本346 905新生兒篩查的串聯(lián)質(zhì)譜遺傳代謝病篩查亦僅發(fā)現(xiàn)2例VLCADD患者，提示亞洲國(guó)家本病罕見(jiàn)。
 

VLCAD作為線粒體脂肪酸β氧化過(guò)程更先進(jìn)步的關(guān)鍵酶，催化含14-18個(gè)碳的不同長(zhǎng)度碳鏈的脂?；o酶A脫氫，其輔酶為黃素腺嘌吟二核昔酸（FAD),由FAD接受脫氫產(chǎn)生的氫原子進(jìn)入線粒體呼吸鏈進(jìn)行氧化磷酸化產(chǎn)生ATP供能。VLCAD在肝臟、心肌、骨骼肌、皮膚成纖維細(xì)胞的線粒體中均有表達(dá)，可催化長(zhǎng)鏈酯酰輔酶A產(chǎn)生烯酯酸輔酶A，再在烯酯酰輔酶A水化酶、羥酯酰CoA脫氫酶、酮酯酰CoA硫解酶這三個(gè)酶的作用下共同完成長(zhǎng)鏈脂肪酸的β氧化過(guò)程，每次生成一個(gè)乙酰輔酶A和少2個(gè)碳原子的酯酰輔酶A。乙酰輔酶A可參與三羧酸循環(huán)進(jìn)行氧化磷酸化供能，也可在肝臟形成酮體，在運(yùn)動(dòng)、饑餓、應(yīng)激等情況下產(chǎn)生能量。VLCAD缺陷將導(dǎo)致體內(nèi)長(zhǎng)鏈脂肪酸代謝障礙，長(zhǎng)鏈脂肪酸不能氧化供能，同時(shí)蓄積在細(xì)胞內(nèi)對(duì)心肌、骨骼肌、肝臟等產(chǎn)生毒性作用，導(dǎo)致VLCADD一系列的臨床癥狀和體征。

極長(zhǎng)鏈酰基輔酶A脫氫酶由ACADVL基因(MIM 609575)編碼ACADVL基因位于染色體17p13.1，長(zhǎng)約5.4kb，含20個(gè)外顯子，編碼655個(gè)氨基酸前體蛋白，其中前40個(gè)氨基酸為前導(dǎo)肽，后615個(gè)氨基酸為成熟的多肽，分子量約為67kD，位于線粒體的內(nèi)膜，屬于脂酰輔酶A脫氫酶（ACADs）家族成員之一，VLCAD為同體蛋白。VLCAD除了有與其他ACADs類(lèi)似的N端400個(gè)氨基酸所形成的源二聚體的線粒體膜蛋白．而其他ACADs為線粒體基質(zhì)的同源四聚α螺旋-β折疊-α螺旋結(jié)構(gòu)外，還另外具有C端180個(gè)氨基酸殘基形成一個(gè)α螺旋將VLCAD蛋白錨定在線粒體內(nèi)膜中，以類(lèi)似于ACADs四聚體中二聚體間的作用方式與N端的兩個(gè)α螺旋相互作用。

基因ACADVL的突變譜高度異質(zhì)，迄今為止，已有116種突變類(lèi)型報(bào)道，尚未發(fā)現(xiàn)某一突變?yōu)闊狳c(diǎn)突變，其中錯(cuò)義突變?yōu)橹饕耐蛔冾?lèi)型，約占總突變的57%，缺失突變約占21%，剪切突變約占11%。多個(gè)研究認(rèn)為極長(zhǎng)鏈脂肪酸脫氫酶缺乏癥患者的基因型與表現(xiàn)型之間存在明顯相關(guān)性，Andresen等研究發(fā)現(xiàn)71%的心肌病型患兒基因突變?yōu)闊o(wú)義突變；而在肝型和肌病型的基因突變中，分別有82%和93%的基因突變?yōu)殄e(cuò)義突變或單個(gè)氨基酸缺失。無(wú)義突變可導(dǎo)致VLCAD有效失去活性，而錯(cuò)義突變或單個(gè)氨基酸的缺失可使VLCAD留有殘余部分酶活性，癥狀較輕。研究還發(fā)現(xiàn)15個(gè)由于小缺失或小插入而導(dǎo)致的框移引起終止密碼子早現(xiàn)的突變和9個(gè)剪切突變導(dǎo)致VLCAD殘余酶活性的喪失，而導(dǎo)致嚴(yán)重的表現(xiàn)型。但Souri等研究發(fā)現(xiàn)錯(cuò)義突變R573W與單個(gè)氨基酸缺失de1258K卻可導(dǎo)致VLCAD酶活性有效喪失。Coughlin等對(duì)一生后38小時(shí)急性死亡的VLCADD患兒研究發(fā)現(xiàn)此患兒存在錯(cuò)義突變V283A，而此突變?cè)谥霸S多研究中發(fā)現(xiàn)存在殘余酶活性，且在新生兒篩查陽(yáng)性兒童和高危家庭篩查中發(fā)現(xiàn)一些無(wú)VLCADD癥狀個(gè)體也存有V283A突變，提示基因型對(duì)預(yù)測(cè)攜帶突變的患者是否存在致命并發(fā)癥的風(fēng)險(xiǎn)存在局限性。Ficicioglu等也認(rèn)為基因突變分析并不能正確預(yù)測(cè)疾病的嚴(yán)重程度。基因突變后的極長(zhǎng)鏈?；o酶A脫氫酶的殘余酶活性不僅僅與基因突變的類(lèi)型有關(guān)，還可能受溫度等外界條件的影響，這可能是當(dāng)患者處于感染發(fā)熱時(shí)臨床表現(xiàn)較重的一個(gè)重要原因。
 

VLCADD的臨床表現(xiàn)有明顯異質(zhì)性，根據(jù)起病年齡和臨床表現(xiàn)可分為3個(gè)類(lèi)型，賊常見(jiàn)的一種類(lèi)型主要在新生兒和嬰兒早期發(fā)病，常有心肌受累，又稱(chēng)心肌病型，此型發(fā)病兇險(xiǎn)，患兒死亡率高，表現(xiàn)為低酮性低血糖、瑞氏綜合征、新生兒猝死、肥厚型和擴(kuò)張型心肌病、心包積液、心律失常、肌酸激酶水平升高；另外兩種類(lèi)型為輕型，包括嬰兒后期或兒童發(fā)病的肝型和青少年或成年發(fā)病的肌病型。肝型患兒常表現(xiàn)為反反復(fù)作的低酮性低血糖，肝功能異常，主要表現(xiàn)為空腹耐力下降和急性低酮性低血糖，通常是在新穎發(fā)生感染性疾病才表現(xiàn)出來(lái)，之后則會(huì)繼發(fā)發(fā)作性低血糖。很少伴有心肌損害，但未經(jīng)及時(shí)診斷和治療也會(huì)有生命危險(xiǎn)。血氨水平可升高，尿酸和肌酸激酶在發(fā)作期也可升高。肌病型主要在青少年至成年期發(fā)病，為遲發(fā)型，癥狀輕，一般不伴有心肌疾病和低血糖，主要表現(xiàn)為運(yùn)動(dòng)、感染或饑餓后的橫紋肌溶解和肌紅蛋白尿，甚至可發(fā)生腎衰竭，可伴有肌無(wú)力，肌肉痛性痙攣或肌痛，血中肌酸激酶的水平很高。

Andresen等報(bào)道的55例VLCADD患者中，25例為心肌病型，占總數(shù)的46%，多在出生3天內(nèi)發(fā)病(76％),伴有心肌病(92%),肝大(80%),肌無(wú)力(52%),預(yù)后較差，20例(80%)早期死亡，提示發(fā)病時(shí)間越早，病情越嚴(yán)重。55例中的21例為肝型，占總數(shù)39%，此型在兒童各期均有發(fā)病，但以4歲以內(nèi)發(fā)病較多，伴有肝大（62%）、肌無(wú)力(62%）、低酮性低血糖(76%）。8人為肌病型，占總數(shù)的15%，均在13歲后發(fā)病，幾乎所有患者有橫紋肌溶解和肌紅蛋白尿，伴有心肌病和肌無(wú)力的各占13%。
 

1.常規(guī)實(shí)驗(yàn)室檢查  可有低酮性低血糖，急性發(fā)作時(shí)可有代謝性酸中毒，肌酸激酶(CK),肌酸激酶同工酶（CK-MB)及乳酸脫氫酶（LDH)水平升高，天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT)水平升高。肌病型患者可有肌紅蛋白尿，尿常規(guī)異?；虬橛心I功能異常。肌活檢可發(fā)現(xiàn)肌肉組織中有大量脂滴蓄積于I型肌纖維。

2.串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)血?；鈮A譜  可發(fā)現(xiàn)有多種長(zhǎng)鏈酰基肉堿譜水平升高，其中以肉豆蔻烯酰基肉堿(C14：l）升高賊為明顯，因此將此項(xiàng)指標(biāo)作為診斷極長(zhǎng)鏈酰基輔酶A脫氫酶缺乏癥賊重要的代謝指標(biāo)。Liehig等認(rèn)為MS/MS進(jìn)行新生兒疾病篩查中，若C14：1大于lμmol/L可診斷為VLCADD患者。除此項(xiàng)指標(biāo)外，可伴有C14：1/C10、C14、C14：2、C16、C18：1等多種長(zhǎng)鏈?；鈮A水平升高，C14：1/C10比值升高也同樣有診斷意義。由于線粒體內(nèi)蓄積的C14-C18?；o酶A需與游離肉堿結(jié)合形成?；鈮A而離開(kāi)線粒體，VLACDD患者同時(shí)也存在組織中游離肉堿水平降低。進(jìn)行尿氣相質(zhì)譜有機(jī)酸分析可發(fā)現(xiàn)二羧酸尿癥，可有己二酸、辛二酸、癸二酸、十二烷二酸等水平升高。在發(fā)作期，尿中除了出現(xiàn)長(zhǎng)鏈雙羧酸外，還出現(xiàn)中鏈雙羧酸，這說(shuō)明過(guò)氧化物酶體ω-氧化正在發(fā)揮其功能，但輕癥患者或甚至伴有橫紋肌溶解患者可無(wú)二羧酸尿癥。

  3.酶學(xué)分析  可對(duì)患者的皮膚成纖維細(xì)胞、外周血淋巴細(xì)胞、心肌和骨骼肌細(xì)胞或組織進(jìn)行極長(zhǎng)鏈?；o酶A脫氫酶活性測(cè)定明確診斷。具體方法：提取細(xì)胞線粒體膜蛋白，加入特定底物棕櫚酰CoA〔16碳），反應(yīng)后用高效液相色譜分析(HPLC)檢測(cè)棕櫚?；鈮A(C16), 棕櫚烯?；鈮A(C16:1)及3-羥基棕櫚烯?；鈮A(C16:OH)濃度，反映極長(zhǎng)鏈酰基輔酶A脫氫酶對(duì)棕櫚酰CoA的氧化作用，測(cè)定反應(yīng)速率，計(jì)算VLCAD酶活性。

4.脂肪酸β氧化流量分析  培養(yǎng)患者的皮膚成纖維細(xì)胞，分別加入用3H標(biāo)記的[9,10 (n)-3H ]肉豆蔻酸酯(C14:0)和[9，10(n)-3H]棕櫚酸酯(C16:0),通過(guò)測(cè)定產(chǎn)物3H20的產(chǎn)生量，反映細(xì)胞中VLCAD對(duì)肉豆蔻酸酯和棕櫚酰酯的氧化率。雖然酶學(xué)分析和脂肪酸氧化流量分析對(duì)VLCADD有確診意義，但檢測(cè)復(fù)雜，尚未常規(guī)普及。

5.病理學(xué)  肝臟脂肪變性，心肌，骨骼肌脂質(zhì)沉積。線粒體外觀可能異常。過(guò)氧化物酶體可能變大。

  6.基因診斷  基因突變分析也是確診VLCADD的金標(biāo)準(zhǔn)，通過(guò)對(duì)ACADVL的20個(gè)外顯子設(shè)計(jì)引物進(jìn)行聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）和DNA測(cè)序?qū)ふ彝蛔円悦鞔_診斷。對(duì)新生兒篩查發(fā)現(xiàn)C14:1升高但小于1 μmol/L診斷含糊的患兒可行此檢測(cè)明確診斷。
 

診斷主要依據(jù)臨床表現(xiàn)以及進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)室檢查來(lái)明確診斷。串聯(lián)質(zhì)譜的酰基肉堿譜分析是重要診斷方法，可發(fā)現(xiàn)有多種長(zhǎng)鏈?；鈮A譜水平升高，其中以肉豆蔻烯?；鈮A（C14:1)升高賊為明顯，因此將此項(xiàng)指標(biāo)作為診斷極長(zhǎng)鏈?；o酶A脫氫酶缺乏癥賊重要的代謝指標(biāo)，同時(shí)尿氣相質(zhì)譜有機(jī)酸分析可發(fā)現(xiàn)二羧酸尿。而疾病的確診則需要酶學(xué)和基因診斷。新生兒篩查中串聯(lián)質(zhì)譜的應(yīng)用大大提高了疾病的早期檢出率，降低了患病新生兒的死亡率。

VLCADD治療原則是避免空腹，高碳水化合物和低脂飲食尤其是限制長(zhǎng)鏈脂肪酸的攝入，補(bǔ)充中鏈甘油三酯(medium chain triglycerides, MCT),對(duì)癥處理及預(yù)防和治療并發(fā)癥。

 1.避免空腹  脂肪酸氧化對(duì)機(jī)體在運(yùn)動(dòng)或長(zhǎng)時(shí)間空腹的能量供應(yīng)起重要作用，運(yùn)動(dòng)或長(zhǎng)時(shí)間空腹可使機(jī)體脂肪分解動(dòng)員增加，當(dāng)脂肪酸代謝通路受阻，尤其是VLCADD，長(zhǎng)鏈脂肪酸代謝的更先進(jìn)步的關(guān)鍵酶缺陷時(shí)，脂肪酸幾乎不能進(jìn)行被氧化供能，同時(shí)過(guò)多動(dòng)員的長(zhǎng)鏈脂肪酸和酰基肉堿蓄積并引起毒性作用。

故頻繁喂養(yǎng)可作為一種簡(jiǎn)單有效的預(yù)防措施為機(jī)體提供足夠的熱量和能量，防止過(guò)多的脂肪動(dòng)員。新生兒患者一般間隔3小時(shí)喂養(yǎng)一次；<6個(gè)月嬰兒間隔4小時(shí)；6-12個(gè)月嬰兒夜間可間隔6-8小時(shí)；1-7歲的兒童自天間隔4小時(shí)，夜間可延長(zhǎng)10小時(shí)喂養(yǎng)；而成人一般間隔8小時(shí)（4-12小時(shí)）。可在夜間或緊張活動(dòng)時(shí)給予生玉米淀粉以加強(qiáng)對(duì)空腹的耐受，生玉米淀粉可持續(xù)釋放葡萄糖，減少低血糖發(fā)生和脂肪的分解動(dòng)員。

2.合理飲食和中鏈甘油三酯(MCT)的使用  飲食結(jié)構(gòu)應(yīng)以碳水化合物為主，減少脂肪尤其是長(zhǎng)鏈脂肪酸攝入，但必須盡力做到必需脂肪酸的攝入，同時(shí)要提供足夠的蛋白質(zhì)。一般健康嬰兒脂肪攝入占總熱量的40%-50%，學(xué)齡兒童占30%-35%。有癥狀的VLCADD患者脂肪攝入占總熱量的25%-30%，尤其注意限制長(zhǎng)鏈脂肪酸和補(bǔ)充MCT。 MCT由辛酸(8碳）及癸酸（10碳）等偶數(shù)碳的中鏈脂肪酸為主要成分構(gòu)成的甘油三酯，這些脂肪酸的代謝不依賴(lài)于VLCAD的催化，中鏈脂肪酸可以直接穿過(guò)線粒體膜，經(jīng)過(guò)線粒體脂肪酸β氧化過(guò)程生成乙酰CoA及生成酮體為機(jī)體功能。心肌病型患兒，MCT比例應(yīng)占總脂肪攝入的90%，而長(zhǎng)鏈脂肪酸占10%。 1歲內(nèi)患兒宜選用賊富含MCT的配方奶(80%脂肪為MCT)，這樣的飲食可逆轉(zhuǎn)心肌病型患者心肌的病理改變;1歲后患兒應(yīng)限制長(zhǎng)鏈脂肪酸攝入不超過(guò)總熱量10%，MCT提供總熱量的20%。肝型和肌病型1歲以內(nèi)患兒可選用富含MCT的配方奶(50%脂肪為MCT)或賊富含MCT的配方奶；1歲以后推薦選擇有利于“心臟健康”飲食，一般脂肪中50%來(lái)自長(zhǎng)鏈脂肪酸，50%來(lái)自MCT。 MCT的辛酸、癸酸等無(wú)糖異生作用，雖其中的甘油可異生為葡萄糖，但產(chǎn)生量少，不能滿足反反復(fù)作低血糖患者的需要。MCT可明顯改善脂肪酸氧化障礙中心肌和骨骸肌癥狀；當(dāng)VLCADD患者處于代謝紊亂時(shí)，補(bǔ)充MCT并不能阻止肝臟的損害，甚至補(bǔ)充過(guò)多MCT會(huì)加重線粒體的氧化應(yīng)激。

3.左旋肉堿  對(duì)于肉堿補(bǔ)充治療脂肪酸β氧化障礙疾病一直存有爭(zhēng)議。在VLCADD中，由于極長(zhǎng)鏈脂肪酸的β氧化通路受阻，而導(dǎo)致線粒體內(nèi)過(guò)多的長(zhǎng)鏈脂肪酸蓄積，這些脂肪酸則需與游離肉堿結(jié)合形成酸基肉堿轉(zhuǎn)運(yùn)出線粒體，這將造成組織以致血中游離肉堿的缺乏，故補(bǔ)充肉堿可以維持血中游離肉堿水平的穩(wěn)定。一般給予50-100mg/(kg· d)左旋肉堿配合飲食治療可以明顯緩解VLCADD患者的心功能異常。短期應(yīng)用可以促進(jìn)酮體生成和減少空腹低血糖的發(fā)生，但過(guò)多則促進(jìn)長(zhǎng)鏈酰基肉堿的生成和蓄積，對(duì)機(jī)體產(chǎn)生毒性作用。

  4.其他治療  對(duì)于反復(fù)低血糖發(fā)作的患者可以靜脈注射葡萄糖以糾正低血糖癥狀。近年研究發(fā)現(xiàn)過(guò)氧化物酶體增殖激活受體(PPAR)α的激活劑苯扎貝特能提高VLCADD細(xì)胞的脂肪酸氧化能力，并提高VLCADD患者細(xì)胞中VLCAD mRNA及蛋自的表達(dá)量，通過(guò)上調(diào)基因表達(dá)來(lái)提高突變體蛋白的酶活性，同時(shí)苯扎貝特還能減少具有毒性作用的長(zhǎng)鏈?；鈮A的生成，明顯改善肌病型VLCADD患者癥狀。文獻(xiàn)報(bào)道肌松劑丹曲洛林鈉鹽對(duì)伴有肌痛性痙攣、肌強(qiáng)直、橫紋肌溶解的成人VLCADD患者具有良好的效果，主要機(jī)制是丹曲洛林鈉鹽能夠結(jié)合骨骼肌肌漿網(wǎng)的主要Ca2＋釋放通道場(chǎng)Ryandonine受體，限制Ca2＋從肌質(zhì)網(wǎng)／肌漿網(wǎng)中釋放，并阻止細(xì)胞內(nèi)Ca2^＋持續(xù)升高，及Ca^2＋升高引起的線粒體功能異常等；還可作用于神經(jīng)肌肉接頭使興奮一收縮耦聯(lián)中斷，以達(dá)到治療目的。