【佳學(xué)基因-基因檢測(cè)】核酸提取技術(shù)簡述(上)
核酸分為脫氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA),都是極性化合物,一般都溶于水,不溶于乙醇、氯仿等有機(jī)溶劑。
細(xì)胞裂解
在核酸提取過程中,裂解細(xì)胞是非常重要的。經(jīng)典的試劑則是 SDS、EDTA和鹽 。鹽提供了一個(gè)合適的裂解環(huán)境 ,同時(shí)也抑制樣品中的核酸酶對(duì)核酸的破壞 、使核酸結(jié)構(gòu)穩(wěn)定。通過使蛋白質(zhì)變性,破壞膜結(jié)構(gòu)及解開與核酸相連接的蛋白質(zhì),從而實(shí)現(xiàn)核酸游離出來。體系中加入蛋白酶K,是利用蛋白酶將蛋白質(zhì)消化成小的片段,促進(jìn)核酸與蛋白質(zhì)的分開,同時(shí),也便于后面的純化操作以及獲得純度更高的核酸。
裂解細(xì)胞的方法有:機(jī)械方法(超聲波處理法、研磨法、勻漿法)、化學(xué)試劑法(SDS、CTAB、NaOH)、酶解法(溶菌酶或蝸牛酶、蛋白酶K)等。含蛋白酶的裂解方法,可以認(rèn)為是抽提基因組 DNA 的優(yōu)選。裂解包括膜蛋白的游離和與基因組 DNA 相連接的蛋白質(zhì)的游離。蛋白酶的作用是使蛋白質(zhì)變小,故而對(duì)蛋白質(zhì)的游離有巨大的促進(jìn)作用;同時(shí),蛋白質(zhì)被蛋白酶消化變小后,有利于蛋白質(zhì)在純化操作中的去除,使賊終獲得的基因組 DNA 的純度更高。裂解液的用量應(yīng)盡力做到能有效裂解樣品,同時(shí)使裂解體系中核酸的濃度適中。濃度過低,將導(dǎo)致沉淀效率低,影響得率;濃度過高,去除雜質(zhì)的過程復(fù)雜且不有效,導(dǎo)致純度下降。
核酸純化
進(jìn)行核酸的純化時(shí),苯酚/氯仿抽提是經(jīng)典的純化技術(shù),細(xì)胞裂解后離心分離含核酸的水相,加入等體積的酚∶氯仿∶異戊醇(25 ∶24 ∶1 體積) 混合液。典型的例子是在酚、氯仿抽提后用乙醇沉淀。也可以使用離子交換介質(zhì)和吸附介質(zhì)。
核酸,DNA,裂解,蛋白質(zhì),RNA,蛋白酶,核酸,DNA,裂解,蛋白質(zhì),RNA,蛋白酶,核酸,DNA,裂解,蛋白質(zhì),RNA,蛋白酶,核酸,DNA,裂解,蛋白質(zhì),RNA,蛋白酶,核酸,DNA,裂解,蛋白質(zhì),RNA,蛋白酶,核酸,DNA,裂解,蛋白質(zhì),RNA,蛋白酶,核酸,DNA,裂解,蛋白質(zhì),RNA,蛋白酶,核酸,DNA,裂解,蛋白質(zhì),RNA,蛋白酶,
- 【佳學(xué)基因檢測(cè)】基因檢測(cè)之歌:基因之謎...
- 【佳學(xué)基因檢測(cè)】為什么有的孩子生來就有基因突變?...
- 【佳學(xué)基因檢測(cè)】孤立性晶狀體異位要做基因檢測(cè)的基本知識(shí)...
- 【佳學(xué)基因檢測(cè)】斯特奇-韋伯綜合征做基因檢測(cè)的必備技能...
- 【佳學(xué)基因檢測(cè)】領(lǐng)了結(jié)婚證,突變檢測(cè)FAP有突變,該告訴她嗎?...
- 【佳學(xué)基因檢測(cè)】GATA3基因評(píng)估分析的意義...
- 【佳學(xué)基因檢測(cè)】基因檢測(cè)包沒有包含F(xiàn)UT3基因怎么辦?...
- 【佳學(xué)基因檢測(cè)】基因檢測(cè)套餐是否應(yīng)當(dāng)有FLOT2基因?...
- 【佳學(xué)基因檢測(cè)】NGS基因檢測(cè)報(bào)告FGS2突變,是什么意思?...
- 【佳學(xué)基因檢測(cè)】全基因測(cè)序FLNA基因檢測(cè)有意義未明突變,我該怎么辦?...
- 【佳學(xué)基因檢測(cè)】PCR基因檢測(cè)XRCC6基因有突變,如何解讀?...
- 【佳學(xué)基因檢測(cè)】高密度芯片基因檢測(cè)FCGRT有突變,結(jié)果正確嗎?...
- 【佳學(xué)基因檢測(cè)】微陣列基因檢測(cè)FPR1突變的結(jié)果高效嗎?...
- 【佳學(xué)基因檢測(cè)】染色體基因檢測(cè)KAT2A存在突變,如何理解?...
- 【佳學(xué)基因檢測(cè)】FISH基因檢測(cè)在FCAR存在突變,會(huì)得什么?。?/strong>...
- 【佳學(xué)基因檢測(cè)】GAGE1基因檢測(cè)有突變會(huì)得什么???...
- 【佳學(xué)基因檢測(cè)】GAGE4基因檢測(cè)應(yīng)該包括多少位點(diǎn)...
- 【佳學(xué)基因檢測(cè)】GDF1基因檢測(cè)找到病因后應(yīng)該用什么靶向藥物?...
- 【佳學(xué)基因檢測(cè)】GABRG1基因檢測(cè)后采用什么藥物治療比較有效果?...
- 【佳學(xué)基因檢測(cè)】GCHFR基因突變的靶向藥物如何才能找到?...
- 【佳學(xué)基因檢測(cè)】GCSH有基因突變與哪些疾病有關(guān)?...
- 【佳學(xué)基因檢測(cè)】FGF6基因序列有異沉常會(huì)引起什么健康風(fēng)險(xiǎn)...
- 【佳學(xué)基因檢測(cè)】解碼GBX2基因突變可以得到哪些重要信息...
- 【佳學(xué)基因檢測(cè)】破解GDF10基因突變后,可以知道哪些秘密信息?...
- 【佳學(xué)基因檢測(cè)】解密GAS2基因檢測(cè)結(jié)果,如何指導(dǎo)一個(gè)的健康?...
- 【佳學(xué)基因檢測(cè)】找到KDSR的突變位點(diǎn)后,如何預(yù)防疾病...
- 【佳學(xué)基因檢測(cè)】結(jié)婚前發(fā)現(xiàn)男朋友有FKBP2基因突變,是否應(yīng)當(dāng)分手?...
- 【佳學(xué)基因檢測(cè)】領(lǐng)了結(jié)婚證,基因檢測(cè)GAS8有突變,該告訴她嗎?...
- 【佳學(xué)基因檢測(cè)】肚子里的胎兒有三個(gè)月了,基因檢測(cè)AFF2突變,該怎么辦?...
- 【佳學(xué)基因檢測(cè)】談戀愛三年了,發(fā)現(xiàn)男朋友存在FRAXE基因突變,這段感情需結(jié)束嗎?...
- 來了,就說兩句!
-
請(qǐng)自覺遵守互聯(lián)網(wǎng)相關(guān)的政策法規(guī),嚴(yán)禁發(fā)布色情、暴力、反動(dòng)的言論。評(píng)價(jià):表情:用戶名: 驗(yàn)證碼:
- 賊新評(píng)論 進(jìn)入詳細(xì)評(píng)論頁>>