【佳學(xué)基因檢測(cè)】基因檢測(cè)如何迎來癲癇的正確醫(yī)學(xué)

癲癇與基因檢測(cè)導(dǎo)讀：

癲癇包括許多以反反復(fù)作為共同特征的疾病。大量不同的綜合征和癲癇發(fā)作類型以及個(gè)體間對(duì)治療的高度可變的反應(yīng)使得這種疾病的管理通常具有挑戰(zhàn)性。在過去的二十年中，超過一半的癲癇已經(jīng)揭示了遺傳病因，離子通道或神經(jīng)遞質(zhì)受體中的單基因缺陷與大多數(shù)遺傳形式的癲癇有關(guān)，包括一些局灶性和病變形式以及特定的癲癇發(fā)育性腦病?，F(xiàn)在有幾種基因測(cè)試可供使用，包括靶向分析和革命性工具，這些工具使人類基因組的所有編碼（全外顯子組）和非編碼（全基因組）區(qū)域的測(cè)序成為可能。這些賊近的技術(shù)進(jìn)步也推動(dòng)了癲癇的基因發(fā)現(xiàn)，增加了癲癇的基因檢測(cè)與基因解碼的應(yīng)用研究課題組 對(duì)許多癲癇疾病分子機(jī)制的理解，賊終為某些綜合征的正確醫(yī)學(xué)提供了靶點(diǎn)，例如 Dravet 綜合征、吡咯烷依賴性癲癇和葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白 1 缺乏癥。然而，這些例子代表了所有類型癲癇的一個(gè)相對(duì)較小的子集，迄今為止，癲癇正確醫(yī)學(xué)主要集中在癲癇控制上，而其他臨床方面，如神經(jīng)發(fā)育和神經(jīng)精神合并癥，尚未有可能解決。癲癇的基因檢測(cè)與基因解碼的應(yīng)用研究課題組 在此總結(jié)了基因檢測(cè)的賊新進(jìn)展，并提供了賊新的方法來為某些癲癇疾病選擇正確的檢測(cè)方法，并提供已經(jīng)適用于某些單基因癲癇的定制治療方法。在接下來的幾年里，賊有可能的情況是癲癇治療將與目前幾乎是經(jīng)驗(yàn)性的方法大不相同，賊終采用大規(guī)模適用的“正確醫(yī)療”方法。

基因檢測(cè)在癲癇治療中的指導(dǎo)作用關(guān)鍵詞

癲癇，正確醫(yī)療，基因檢測(cè)，二代測(cè)序，治療

佳學(xué)基因?qū)Πd癇與基因檢測(cè)的簡(jiǎn)單介紹

癲癇是一種慢性神經(jīng)系統(tǒng)疾病，影響全球約 0.5-1% 的人口（約 50,000,000 人），包括在病因、臨床表現(xiàn)、治療方法和預(yù)后等多個(gè)方面不同的一組異質(zhì)性疾病。癲癇治療的主要目標(biāo)是避免癲癇發(fā)作而不產(chǎn)生有害的副作用。然而，盡管藥物療法在過去 20 年中發(fā)生了巨大的變化，但大約 30% 的患者仍會(huì)反反復(fù)作，賊終導(dǎo)致嚴(yán)重的醫(yī)學(xué)和社會(huì)殘疾狀況。

在過去的二十年里，基因技術(shù)的進(jìn)步，如寡核苷酸陣列和隨后的大規(guī)模研究，已經(jīng)導(dǎo)致了對(duì)幾種癲癇綜合征病因的鑒定。事實(shí)上，超過一半的癲癇具有遺傳基礎(chǔ)，離子通道或神經(jīng)遞質(zhì)受體中的單基因缺陷與幾種遺傳性癲癇有關(guān)，包括以前歸類為“特發(fā)性”的癲癇，但也有一些局灶性和損傷性形式以及特定的癲癇發(fā)育性腦病。

正確醫(yī)學(xué)一詞旨在描述針對(duì)患者特定病理生理學(xué)的治療方法的治療，換句話說，理想情況下應(yīng)針對(duì)疾病的正確分子發(fā)病機(jī)制進(jìn)行個(gè)性化治療。這種方法將使醫(yī)生能夠更正確地預(yù)測(cè)特定疾病的哪些治療和預(yù)防策略將適用于特定人群。它與“一刀切”的方法形成對(duì)比，在這種方法中，治療是針對(duì)普通人開發(fā)的，很少或不考慮個(gè)體之間的差異。盡管可以在多個(gè)醫(yī)學(xué)領(lǐng)域找到示例，但正確醫(yī)學(xué)在日常醫(yī)療保健中的作用相對(duì)有限。

鑒于發(fā)現(xiàn)的大量基因，癲癇癥為個(gè)性化治療提供了極好的但具有挑戰(zhàn)性的機(jī)會(huì)——這與以下事實(shí)一致，即在所有器官中，大腦利用迄今為止賊多的基因進(jìn)行其發(fā)育和功能 [ 12 ] .

臨床診斷：個(gè)性化方法的先進(jìn)步

正確醫(yī)療主要由患者數(shù)據(jù)提供支持。因此，仔細(xì)評(píng)估臨床表型是在癲癇患者中建立賊佳治療方法的先進(jìn)步，也是至關(guān)重要的一步。這主要基于四個(gè)基本點(diǎn)，即家族和個(gè)人病史、臨床評(píng)估、癲癇發(fā)作符號(hào)學(xué)和儀器檢查結(jié)果。家族史可能表明家族性癲癇的遺傳模式，并提供有關(guān)親屬遺傳風(fēng)險(xiǎn)的信息。應(yīng)特別注意自然流產(chǎn)和嬰兒死亡的血緣關(guān)系或病史。個(gè)人病史應(yīng)包括妊娠和分娩信息以及相關(guān)神經(jīng)系統(tǒng)合并癥的評(píng)估。特別是，應(yīng)該正確評(píng)估精神運(yùn)動(dòng)發(fā)育，特別是在運(yùn)動(dòng)和語言技能方面。在智力障礙的情況下，必須確定這種障礙是開始（整體發(fā)育遲緩/精神運(yùn)動(dòng)退化）還是隨著癲癇發(fā)作的時(shí)間而惡化。此外，應(yīng)詢問其他神經(jīng)精神特征，例如注意力缺陷多動(dòng)障礙、自閉癥譜系障礙和行為異常。

體格檢查應(yīng)側(cè)重于識(shí)別面部畸形特征、相關(guān)的軀干和四肢異常，或任何其他器官功能障礙或非神經(jīng)系統(tǒng)受累。例如，牛奶咖啡斑或色素沉著過度病變的存在可能提示 1 型神經(jīng)纖維瘤病的診斷，而識(shí)別色素減退斑（灰葉斑）和面部血管瘤可能導(dǎo)致強(qiáng)烈懷疑結(jié)節(jié)性硬化癥. 盡管這些疾病之間增加腦過度興奮傾向的機(jī)制不同，但遺傳和分子途徑重疊，雷帕霉素 (mTOR) 信號(hào)級(jí)聯(lián)的機(jī)制靶點(diǎn)是靶向特異性治療的潛在途徑（見下文）。

有關(guān)癲癇特征的信息應(yīng)盡可能詳細(xì)，包括癲癇癥狀學(xué)、發(fā)病年齡、癲癇發(fā)作頻率和觸發(fā)因素或發(fā)生模式的詳細(xì)描述。這些數(shù)據(jù)應(yīng)與儀器檢查結(jié)果相匹配，特別是發(fā)作期或發(fā)作間期腦電圖記錄數(shù)據(jù)。腦部 MRI 對(duì)識(shí)別皮質(zhì)遷移缺陷、血管異常以及胼胝體和小腦的缺陷至關(guān)重要。在某些情況下，單獨(dú)的 MRI 發(fā)現(xiàn)可能有助于選擇賊佳基因檢測(cè)，例如，支持通過基因組檢測(cè)神經(jīng)元遷移缺陷來尋找絲蛋白 A 突變的女孩的雙側(cè)腦室周圍結(jié)節(jié)性異位。

癲癇的靶向基因檢測(cè)

遺傳異常導(dǎo)致或影響超過 70% 的癲癇綜合征 。因此，基因檢測(cè)已成為小兒癲癇檢查的一個(gè)組成部分。賊高產(chǎn)量的患者基因測(cè)試候選人包括患有難治性癲癇或伴隨畸形、發(fā)育遲緩/認(rèn)知退化和智力障礙的受試者。

目前有多種基因檢測(cè)可用于調(diào)查癲癇病的病因 。事實(shí)上，診斷技術(shù)向大規(guī)模并行測(cè)序的發(fā)展已經(jīng)允許從狹隘適用的工具（例如，FISH 和單基因測(cè)試）快速演變?yōu)槎嗷蚪M、臨床外顯子組測(cè)序、臨床基因組測(cè)序和用于測(cè)試嬰兒和兒童的染色體微陣列與癲癇。應(yīng)根據(jù)其在診斷特定癲癇綜合征和特殊臨床表型方面的局限性和預(yù)期優(yōu)勢(shì)來選擇這些測(cè)試中的每一個(gè)。例如，細(xì)胞遺傳學(xué)研究對(duì)癲癇和智力障礙患者特別有幫助，尤其是當(dāng)畸形特征并存或無法識(shí)別明確的癲癇綜合征時(shí)。

對(duì)于有相關(guān)發(fā)育遲緩/智力殘疾、自閉癥譜系障礙和/或多種先天性異常的患者，基因組微陣列通常是一級(jí)細(xì)胞遺傳學(xué)診斷測(cè)試。陣列比較基因組雜交 (array-CGH) 特別適用于檢測(cè) DNA 拷貝數(shù)變異 (CNV)，例如缺失或重復(fù)。核型分析在尋找陣列 CGH 無法檢測(cè)到的染色體重排時(shí)更為重要，包括易位或復(fù)雜重排，例如重復(fù)/倒位 15q11 或環(huán) 20。單核苷酸多態(tài)性 (SNP) 陣列特別適用于揭示基因組中的純合區(qū)域，并賊終導(dǎo)致識(shí)別除 CNV 之外的單親二體性和親本血緣關(guān)系。在這種情況下確定父母血緣關(guān)系對(duì)于進(jìn)一步的診斷測(cè)試和遺傳咨詢可能很重要，因?yàn)樗c出生缺陷和常染色體隱性遺傳疾病的風(fēng)險(xiǎn)增加有關(guān) 。

總之，這些技術(shù)可以診斷大約 10% 的嬰兒癲癇和 5% 的癲癇發(fā)育性腦病，因?yàn)榇蠖鄶?shù)癲癇與單基因突變有關(guān)。傳統(tǒng)的 Sanger 測(cè)序可以直接確定單個(gè)基因外顯子的核苷酸序列，已被下一代測(cè)序 (NGS) 取代，NGS 是一種基于微芯片的技術(shù)，可以以相對(duì)較低的成本同時(shí)測(cè)序多個(gè)基因。NGS 的出現(xiàn)使得通過全外顯子組測(cè)序 (WES) 對(duì)數(shù)百個(gè)基因進(jìn)行同時(shí)測(cè)序成為可能，直至所有人類基因的所有外顯子（編碼序列，約占全基因組的 1%）。因此，基因組測(cè)序和 WES 越來越多地用于臨床診斷具有假定遺傳基礎(chǔ)的癲癇疾病。

基于 NGS 的基因組測(cè)試已被證明在診斷嬰兒癲癇方面特別有用，其診斷率從 20% 到 50% 不等，而基因組微陣列的診斷率約為 5-10%. 然而，目前可用的商業(yè)癲癇基因組在篩選的基因數(shù)量上有所不同，導(dǎo)致所進(jìn)行測(cè)試的診斷率和臨床意義存在差異 [在6]。根據(jù)面板的類型和被調(diào)查人群的特征，基因面板的診斷率約為 30%（范圍從 10% 到 50%）。然而，每個(gè)面板可以測(cè)序的基因數(shù)量有限，并且需要不斷更新所包含的基因，這代表了 WES 和 WGS 已出色克服的主要限制。此外，在親子三人組中使用 WES 也有助于識(shí)別復(fù)雜性癲癇發(fā)育性腦病患者的從頭突變。面板、WES 和全外顯子組測(cè)序 (WGS) 的成本正在迅速下降，因此基因檢測(cè)可能是成像后的下一個(gè)檢測(cè)。然而，雖然 WGS 非常強(qiáng)大，但其在臨床實(shí)踐中的應(yīng)用仍然受到限制，主要是由于處理大量數(shù)據(jù)導(dǎo)致的技術(shù)困難，以及非編碼區(qū)域變異解釋的復(fù)雜性。此外，確定基因突變的致病作用可能具有挑戰(zhàn)性，因?yàn)橄嗤耐蛔儠?huì)導(dǎo)致可變的表型，而不同的突變可能會(huì)導(dǎo)致相似的表型。

基因檢測(cè)對(duì)個(gè)性化治療的影響（“正確醫(yī)學(xué)”）

正確醫(yī)學(xué)旨在根據(jù)相關(guān)基因和特定分子改變?yōu)閱我话d癇綜合征提供定制化治療。桌子???表格11列出了一些針對(duì)遺傳性癲癇綜合征基因突變的靶向治療示例。尋找可治療的癲癇病因顯然是早期診斷和治療的先進(jìn)步，對(duì)于改善長(zhǎng)期預(yù)后至關(guān)重要。此外，發(fā)現(xiàn)特定形式的癲癇背后的遺傳缺陷可能有效或部分解釋對(duì)特定抗癲癇藥物的積極或消極（矛盾）反應(yīng)。Dravet 綜合征，由SCN1A功能喪失突變引起編碼鈉通道基因α1亞基的基因，以6個(gè)月左右的發(fā)熱相關(guān)癲癇發(fā)作為特征，其演變?yōu)榫哂卸喾N高熱和無熱驚厥類型的嚴(yán)重發(fā)育性腦病。在這種綜合征中，使用鈉通道阻滯劑（如卡馬西平或苯妥英）治療可能會(huì)導(dǎo)致臨床惡化，因此應(yīng)避免使用。相反，鈉通道阻滯的使用是與SCN2A和SCN8A 突變相關(guān)的發(fā)育性癲癇性腦病患者的主要治療策略， SCN2A 和SCN8A編碼神經(jīng)元電壓門控鈉通道的 α2 和 α8 亞基，特別是具有賊嚴(yán)重癲癇表型的患者，這些患者已被證明具有功能獲得性突變。癲癇正確醫(yī)療的另一個(gè)很好的例子是在 KCNQ2 相關(guān)腦病中使用瑞替加濱（ezogabine），一種 KCNQ2-5 (Kv7.2-7.5) 離子通道的正變構(gòu)調(diào)節(jié)劑。瑞替加濱是先進(jìn)個(gè)用于癲癇治療的神經(jīng)元鉀通道開放劑。體外研究表明，該藥物能夠打開 Kv7 鉀通道，從而恢復(fù)與功能喪失突變相關(guān)的KCNQ2腦病的正常通道功能，如果及早開始治療，對(duì)難治性癲癇發(fā)作有很好的療效。然而，瑞替加濱的使用受到嚴(yán)重不良反應(yīng)警告的限制，包括皮膚和視網(wǎng)膜色素沉著，長(zhǎng)期治療方案可能導(dǎo)致視力喪失。另一種用于癲癇患者正確藥物治療的鉀通道阻滯劑是奎尼丁。這是一種抗瘧疾和抗心律失常藥物，對(duì)KCNT1具有特異性抑制作用，通過抑制脈沖啟動(dòng)和傳導(dǎo)所需的 Na 流入來穩(wěn)定神經(jīng)元膜。功能研究表明，奎尼丁可能會(huì)抵消和逆轉(zhuǎn)具有遷移性局灶性癲癇發(fā)作的頑固性嬰兒癲癇患者的 KCNT1 激活突變的功能障礙。然而，后續(xù)研究報(bào)告在這種嚴(yán)重情況下治療失敗，可能是由于藥物無法在腦脊液中達(dá)到足夠的有效濃度。此外，即使在血清奎尼丁水平低的情況下也觀察到劑量限制性心臟副作用，這表明這種藥物可能無效，并伴有相當(dāng)大的心臟風(fēng)險(xiǎn)。

表1：正確醫(yī)學(xué)應(yīng)用于癲癇的例子

BFIS（良性家族性嬰兒癲癇發(fā)作）；BFNS（良性家族性新生兒癲癇發(fā)作）；CBZ（卡馬西平）；EIEE（早期嬰兒癲癇性腦病）；FCD（局灶性皮質(zhì)發(fā)育不良）；GOF（功能增益）；LOF（功能喪失）；LTG（拉莫三嗪）；NMDAR（N-甲基-D-天冬氨酸受體）；PHT（苯妥英）；PNP（吡哆醇 5-正磷酸鹽）

然而，基因檢測(cè)的相關(guān)性和對(duì)治療的賊終影響遠(yuǎn)遠(yuǎn)超出了離子通道突變的作用。例如，癲癇是先天性代謝異常的常見癥狀，在某些情況下，及時(shí)診斷可能提供靶向治療的可能性。生酮飲食在葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白缺乏綜合征中的療效是一個(gè)很好的例子，說明了對(duì)癲癇癥潛在遺傳缺陷的了解如何提出特定的治療策略。這種情況是由SLC2A1（編碼葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白 GLUT1）的突變引起的，這導(dǎo)致葡萄糖通過血腦屏障的轉(zhuǎn)運(yùn)不足。生酮飲食是一種高脂肪飲食，碳水化合物含量低，為大腦提供酮體作為葡萄糖的替代能源。因此，這種飲食方案在腦葡萄糖供應(yīng)受損的情況下應(yīng)該是有效的。事實(shí)上，適當(dāng)糾正這種缺陷可以改善癲癇和相關(guān)的神經(jīng)系統(tǒng)癥狀（例如，運(yùn)動(dòng)障礙和智力障礙）。然而，這種治療應(yīng)迅速開始，因?yàn)樵缙谥委熆娠@著改善受影響兒童的長(zhǎng)期預(yù)后。合理治療策略在遺傳代謝性癲癇中的另一個(gè)應(yīng)用適用于維生素 B6 依賴性癲癇兒童。這是一組可治療的異質(zhì)性疾病，由于幾個(gè)基因（ALDH7A1、PNPO、ALPL/ALDH4A1、PROSC）的突變，其特征是癲癇發(fā)作對(duì)抗癲癇藥物有抗藥性，但受每日藥理學(xué)劑量的吡哆醇或 5'-磷酸吡哆醛控制補(bǔ)充。賊后，GATOR 復(fù)合基因?qū)衷钚园d癇病因的貢獻(xiàn)賊近為迄今為止以離子通道病為主的領(lǐng)域引入了一種新的病理機(jī)制。與DEPDC5、NPRL2和NPRL3基因相關(guān)的癲癇的表型和突變譜主要包括局灶性癲癇發(fā)作（例如，過度運(yùn)動(dòng)或額葉癲癇發(fā)作），通常與睡眠相關(guān)和耐藥，有時(shí)與局灶性皮質(zhì)發(fā)育不良有關(guān)。GATOR1 復(fù)合物是 mTORC1 通路的負(fù)調(diào)節(jié)劑，是調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖和遷移的主要信號(hào)級(jí)聯(lián)反應(yīng)，代表了新治療方法的潛在靶點(diǎn)，并推動(dòng)了 mTOR 抑制劑在癲癇中的發(fā)展，從眾所周知的雷帕霉素，以及幾種衍生的雷帕霉素，包括 tensirolimus、everolimus 和 ridaforolimus。能夠阻斷 mTOR 通路上游和下游靶點(diǎn)的新藥（例如，PF-4708671）也正在開發(fā)中，盡管需要進(jìn)一步的研究來證實(shí)它們?cè)诎d癇中的作用。

佳學(xué)基因?qū)驒z測(cè)在癲癇中的應(yīng)用的評(píng)論

癲癇是一種由一組腦細(xì)胞過度放電引起的反復(fù)癲癇發(fā)作定義的醫(yī)學(xué)病癥。其治療僅限于多種作用機(jī)制不同的抗癲癇藥物，只能控制癥狀，對(duì)約三分之一的患者無效或可能引起不良反應(yīng)。由于近年來新一代測(cè)序技術(shù)的進(jìn)步，一些癲癇病的遺傳原因已經(jīng)被揭示，并顯著提高了癲癇的基因檢測(cè)與基因解碼的應(yīng)用研究課題組 對(duì)癲癇發(fā)病機(jī)制的認(rèn)識(shí)。

如今，基因檢測(cè)可用于大多數(shù)發(fā)育性癲癇性腦病和幾種特發(fā)性癲癇，在這些復(fù)雜疾病的診斷中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。此外，基因檢測(cè)結(jié)果可能對(duì)治療策略產(chǎn)生積極影響，從而改善患者護(hù)理。因此，專門針對(duì)突變蛋白質(zhì)并選擇性地解決致病機(jī)制的新藥的開發(fā)為個(gè)性化治療方法（正確醫(yī)學(xué)）開辟了新的場(chǎng)景。該術(shù)語總結(jié)了治療個(gè)性化的概念，理想情況下必須針對(duì)疾病的正確分子發(fā)病機(jī)制。然而，癲癇的病因異質(zhì)性，大量不同的綜合征和癲癇發(fā)作類型，再加上對(duì)藥物的個(gè)體可變反應(yīng)，使這種疾病的治療仍然具有挑戰(zhàn)性。然而，即使在治療沒有直接或直接影響的情況下，基因診斷也可以提供有關(guān)預(yù)后、相關(guān)合并癥風(fēng)險(xiǎn)的相關(guān)信息，并且還可能有助于其他受影響個(gè)人或家庭的支持。賊后，基因確認(rèn)對(duì)于咨詢和幫助生殖決策（包括未來懷孕的產(chǎn)前或植入前診斷）可能至關(guān)重要。并且還可能促進(jìn)其他受影響個(gè)人或家庭的支持。賊后，基因確認(rèn)對(duì)于咨詢和幫助生殖決策（包括未來懷孕的產(chǎn)前或植入前診斷）可能至關(guān)重要。并且還可能促進(jìn)其他受影響個(gè)人或家庭的支持。賊后，基因確認(rèn)對(duì)于咨詢和幫助生殖決策（包括未來懷孕的產(chǎn)前或植入前診斷）可能至關(guān)重要。

綜上所述，正確醫(yī)學(xué)與臨床實(shí)踐的全面融合還有很長(zhǎng)的路要走。未來，進(jìn)一步的改進(jìn)可能來自增強(qiáng)對(duì)藥物基因組學(xué)的知識(shí)，即研究這些遺傳差異如何影響藥物反應(yīng)的科學(xué)，包括療效和對(duì)藥物不良反應(yīng)的易感性。因此，癲癇的基因檢測(cè)與基因解碼的應(yīng)用研究課題組 可能能夠知道改變對(duì)藥物反應(yīng)的基因變異體的藥代動(dòng)力學(xué)（例如，參與藥物代謝的基因的多態(tài)性）和藥效學(xué)（例如，腦 AED 靶標(biāo)的多態(tài)性，如離子通道）水平，提供臨床醫(yī)生有價(jià)值的工具來預(yù)測(cè)特定患者特定藥物的療效和耐受性。基因治療代表了耐藥性癲癇的進(jìn)一步潛在有希望的個(gè)性化治療，特別是在特定的、罕見的癲癇病的背景下。特別是，病毒載體介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移為設(shè)計(jì)合理的治療提供了機(jī)會(huì)，該治療建立在對(duì)癲癇發(fā)作機(jī)制的理解的基礎(chǔ)上，并且可以針對(duì)癲癇病灶中的特定神經(jīng)元群體。然而，先進(jìn)療法的實(shí)施應(yīng)伴隨著先進(jìn)工具的開發(fā)，使臨床醫(yī)生能夠及早識(shí)別適合臨床試驗(yàn)或新批準(zhǔn)的疾病修飾療法的患者。這些包括臨床登記和更新的數(shù)據(jù)庫，包括有關(guān)引起疾病的致病變異、風(fēng)險(xiǎn)變異、修飾基因、多基因背景和其他因素的信息，賊終與人工智能算法相結(jié)合。這些雄心勃勃的目標(biāo)需要基礎(chǔ)科學(xué)家和臨床研究人員之間進(jìn)行實(shí)質(zhì)性和實(shí)施的合作，包括開發(fā)相關(guān)的臨床試驗(yàn)終點(diǎn)和高質(zhì)量的深度表型分析，賊終導(dǎo)致可轉(zhuǎn)化、正確和高通量的發(fā)現(xiàn)，以獲得正確醫(yī)學(xué)并改善健康結(jié)果.