【佳學(xué)基因檢測】基因檢測揭示精神病患者基因突變的致病性

致病基因鑒定基因解碼建立了基因突變與人體必需的功能蛋白的聯(lián)系

SLCO1B1（溶質(zhì)載體有機陰離子轉(zhuǎn)運蛋白家族成員1B1）基因編碼的OATP1B1（有機陰離子轉(zhuǎn)運多肽1B1）蛋白的變體與轉(zhuǎn)運功能的改變有關(guān)，這可能使患者對他汀類藥物治療產(chǎn)生不良藥物反應(yīng)。精神科疾病的致病基因鑒定基因解碼了六種在精神病患者中發(fā)生的罕見SLCO1B1單核苷酸變體（SNVs）對OATP1B1蛋白表達和功能的影響?；蚪獯a基因檢測對9381名一生中至少有一次精神病發(fā)作的個體進行了外顯子測序。通過PHRED縮放的綜合注釋依賴（CADD）評分和Ensembl變異效應(yīng)預(yù)測器對SLCO1B1 SNVs進行了注釋。對PHRED縮放CADD評分>10且預(yù)測為錯義變異的SNVs進行了體外功能研究。為了估計變體可能導(dǎo)致的轉(zhuǎn)運活性變化，測量了表達OATP1B1的HEK293細胞中2',7'-二氯熒光素（DCF）的轉(zhuǎn)運情況。根據(jù)這些發(fā)現(xiàn)，還進行了羅蘇伐他汀和雌酮硫酸鹽的額外測試。使用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法（LC-MS/MS）對粗膜組分中的OATP1B1含量進行了定量。

研究人群中共發(fā)現(xiàn)六種罕見的SLCO1B1錯義變體，分別位于跨膜螺旋3：c.317T>C（p.106I>T）、胞內(nèi)環(huán)2：c.629G>T（p.210G>V）、c.633A>G（p.211I>M）、c.639T>A（p.213N>L）、跨膜螺旋6：820A>G（p.274I>V）和C末端：2005A>C（p.669N>H）。在這些變體中，SLCO1B1 c.629G>T（p.210G>V）導(dǎo)致體外功能喪失，有效抑制了DCF、雌酮硫酸鹽和羅蘇伐他汀的攝取，并將膜蛋白表達降低至參考OATP1B1的31%。在六種罕見的錯義變體中，SLCO1B1 c.629G>T（p.210G>V）導(dǎo)致OATP1B1轉(zhuǎn)運功能的喪失，并嚴重降低了膜蛋白的豐度。攜帶SLCO1B1 c.629G>T的個體可能對OATP1B1底物藥物的藥代動力學(xué)變化敏感，并可能增加諸如他汀類藥物相關(guān)的肌肉骨骼癥狀等不良藥物反應(yīng)的風(fēng)險。

致病基因鑒定基因解碼的立項依據(jù)

他汀類藥物是世界上賊常見的處方藥之一，用于降低低密度脂蛋白膽固醇濃度和預(yù)防心血管疾病。溶質(zhì)載體有機陰離子轉(zhuǎn)運體家族成員1B1（SLCO1B1）基因編碼有機陰離子轉(zhuǎn)運多肽1B1（OATP1B1），這是一種跨膜蛋白，參與他汀類藥物和其他化合物從血液向肝細胞的轉(zhuǎn)運。

SLCO1B1中的單核苷酸變異（SNVs）與轉(zhuǎn)運體功能受損有關(guān)，這可能改變他汀類藥物的全身暴露。因此，這可能使患者容易出現(xiàn)包括他汀類藥物相關(guān)的肌肉骨骼癥狀（SAMS）甚至橫紋肌溶解在內(nèi)的不良藥物反應(yīng)，從而影響他汀類藥物的依從性和他汀類療法的長期有效性。心血管疾病是精神分裂癥患者過量死亡的主要原因之一?？咕癫∷幬?，特別是第二代抗精神病藥物，如氯氮平和奧氮平，可誘發(fā)包括血脂異常在內(nèi)的代謝異常。因此，他汀類藥物通常開具給患有精神疾病的患者。

美國食品藥品監(jiān)督管理局（FDA）和歐洲藥品管理局（EMA）認識到OATP1B1變異在藥物安全性中的重要性，并為研究藥物轉(zhuǎn)運體在藥物開發(fā)中對藥代動力學(xué)的影響提供了指南。

藥物遺傳學(xué)研究一直受到樣本量小的困擾，在探索罕見遺傳變異時，找到足夠大的患者群體通常很困難。SLCO1B1的罕見變異未列入基因檢測數(shù)據(jù)庫中，而基因解碼提供了跨越這一鴻溝的解決方案，盡管它們對藥物安全性的影響可能與常見變異的影響一樣重要。從大量全外顯子組測序數(shù)據(jù)中解讀遺傳變異仍然是一個挑戰(zhàn)，需要在生物層面探索已確定的變異之前，使用計算工具來預(yù)測藥物遺傳變異的功能影響。有各種算法可用于預(yù)測編碼變異的功能影響，這些算法使用標準標準和評分指標或機器學(xué)習(xí)方法。對計算機評估的變異進行生物學(xué)評估是必要的，以生成可臨床操作的建議。

佳學(xué)基因解碼研究了9381名精神疾病患者中發(fā)生的罕見SLCO1B1單核苷酸變異（SNVs）的潛在臨床相關(guān)性。這些變異是根據(jù)PHRED縮放的綜合注釋依賴（CADD）評分算法和Ensembl變異效應(yīng)預(yù)測器（VEP）對錯義變異的計算機預(yù)測損害性選擇的，用于體外表達和功能性實驗。在過表達OATP1B1的HEK293細胞中進行了細胞攝取研究，并使用基于液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜（LC-MS/MS）的定量靶向先進蛋白質(zhì)組學(xué)（QTAP）分析量化了粗膜部分HEK293細胞中OATP1B1變異蛋白的數(shù)量。致病基因鑒定基因解碼的結(jié)果為SLCO1B1 c.317T>C（p.I106T）、c.629G>T（p.G210V）、c.633A>G（p.I211M）、c.639T>A（p.N213K）、c.820A>G（p.I274V）和c.2005A>C（p.N669H）變異提供其致病性的結(jié)構(gòu)與功能注釋，從而進一步驗證了基因檢測的科學(xué)性。