【佳學(xué)基因-基因檢測】實時熒光定量PCR技術(shù)簡介與應(yīng)用
實時熒光定量PCR是1996 年由美國Applied Biosystems 公司推出的一種新定量試驗技術(shù)，被廣泛應(yīng)用到生物學(xué)和醫(yī)學(xué)的各個領(lǐng)域， 不僅涉及到對DNA的定量， 核酸多態(tài)性分析， 基因突變分析等，同時對染色體病的診斷、基因病的診斷、腫瘤研究以及用藥評估方面都有廣泛應(yīng)用。腫瘤基因檢測哪里做？
實時熒光定量PCR技術(shù)有很多優(yōu)點，例如特異性好、正確性高、靈敏度高、可定量檢測、 誤差小、操作簡單、自動化程度高、交叉污染和污染環(huán)境機會少等。 同時因不需雜交、電泳、凝膠成像。此外， 實時熒光定量PCR技術(shù)在動物檢疫和環(huán)境監(jiān)測等方面也得到了廣泛的應(yīng)用， 使人們的健康得到保障， 同時， 也可使人們深入探索微生物群落與環(huán)境因子之間的相互作用及其動態(tài)變化過程。腫瘤基因檢測哪里做？
實時熒光定量PCR 包括探針類和染料類兩種，探針類是利用與靶序列特異雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加， 染料類如SYBR Green I 則是利用與雙鏈DNA 小溝結(jié)合發(fā)光的理化特征指示擴增產(chǎn)物的增加對病原DNA 的檢測。Taqman探針法是高度特異的定量PCR技術(shù)，其核心是利用taq酶的3’-5’外切核酸酶活性，切斷探針，產(chǎn)生熒光信號。由于探針和模板是特異性結(jié)合，所以熒光信號的強弱就代表了模板的數(shù)量。
針對遺傳病的基因突變，設(shè)計跨越突變位點的熒光探針，對跨越突變位點的一段基因進行擴增。擴增結(jié)束時，對產(chǎn)物進行緩慢加熱以獲得熔解曲線，根據(jù)熔解曲線判斷是否有基因突變。腫瘤基因檢測哪里做？
對某種基因型疾病實施藥物治療后，用實時熒光定量PCR 對相關(guān)基因是否轉(zhuǎn)錄或轉(zhuǎn)錄量的多少均可以快速正確的監(jiān)控，對臨床有重要指導(dǎo)意義。
癌基因的表達增加和突變在許多腫瘤早期和良性階段就會出現(xiàn)， 實時熒光定量PCR不但能有效地檢測基因的突變，而且能正確測定表達量，據(jù)此可進行腫瘤早期診斷、分型、分期和預(yù)后判斷。
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