【佳學(xué)基因檢測(cè)】骨關(guān)節(jié)炎基于基因檢測(cè)的分子診斷分型

對(duì)臨床表型和分子內(nèi)型的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行清晰的界定對(duì)于解碼任何疾病的機(jī)制都是至關(guān)重要的。這一點(diǎn)在在骨關(guān)節(jié)炎研究和臨床診斷與治療中也開始得到明確的認(rèn)識(shí)。可溶性生化標(biāo)記物對(duì)于患者的分子內(nèi)分型和制作用于區(qū)別不同臨床表型的分子圖譜都特別有用。然而，骨關(guān)節(jié)炎患者的臨床表征相互重疊，這使得識(shí)別和鑒別不同的分子內(nèi)型及其相應(yīng)的臨床特征的任務(wù)復(fù)雜化。此外，共病現(xiàn)象可能反應(yīng)了不同分子型型及臨床表征的存在及其程度。

對(duì)其他領(lǐng)域（如哮喘）的分子內(nèi)型和臨床表型的研究表明，“臨床表型”一詞應(yīng)與疾病的表現(xiàn)有關(guān)，而“分子內(nèi)型”應(yīng)與疾病的分子發(fā)病機(jī)制有關(guān)，而忽略其臨床表現(xiàn)。不幸的是，這些定義還沒有在骨關(guān)節(jié)炎文獻(xiàn)中統(tǒng)一使用。但佳學(xué)基因等機(jī)構(gòu)在構(gòu)建《人的基因序列變化與人體疾病表征》及《人類基因突變數(shù)據(jù)庫》中，開始有意識(shí)的使用這些名詞，并努力使其定義和方法標(biāo)準(zhǔn)化。佳學(xué)基因在2015年以前使用的分子分型，而后開始使用分子內(nèi)型。

目前的證據(jù)表明，骨關(guān)節(jié)炎患者可以根據(jù)驅(qū)動(dòng)基因發(fā)生的因素，分為多個(gè)分子內(nèi)型的亞型。其主要依據(jù)是將重點(diǎn)關(guān)注到疾病的分子內(nèi)型的分子標(biāo)志物、疾病的主要驅(qū)動(dòng)因素，而不是臨床表型。這樣，根骨關(guān)節(jié)炎根據(jù)機(jī)理可以分為：

（1） 炎癥表型（局部和全身）

（2） 代謝綜合征表型

（3） 衰老相關(guān)表型

（4） 內(nèi)分泌表型（雌激素缺乏）

（5） 肌細(xì)胞減少性肌肉表型（超出本綜述的范圍）

從臨床表征上來看，骨關(guān)節(jié)炎被分為六種類型：包括炎癥型、代謝綜合征型、骨代謝型和軟骨代謝型。

骨關(guān)節(jié)炎的表型分類（關(guān)節(jié)炎患者可以根據(jù)驅(qū)動(dòng)因素分為不同的亞型。其中軟骨、骨和滑膜型都會(huì)受到外在的內(nèi)的疾病驅(qū)動(dòng)因素的影響：如炎癥、劇烈損傷、生物力學(xué)改變、代謝重編程及免疫調(diào)節(jié)）

炎癥分子內(nèi)型生物標(biāo)志物

基因解碼表明，骨關(guān)節(jié)炎除了機(jī)械成分外，還有大量的炎癥成分。骨關(guān)節(jié)炎的炎癥內(nèi)型以高水平的局部和全身炎癥生物標(biāo)志物做為特征。全身性、系統(tǒng)性炎癥與骨關(guān)節(jié)炎有關(guān)，有證據(jù)表明血液中c-反應(yīng)蛋白（CRP，肝臟對(duì)炎癥反應(yīng)產(chǎn)生的一種蛋白質(zhì)）、c-反應(yīng)蛋白M（CRPM，CRP的一種炎癥衍生物）、腫瘤壞死因子a（TNF-a）、白細(xì)胞介素6（IL-6，一種主要來源于肝臟的炎癥細(xì)胞因子）、白細(xì)胞介素17（IL-17，來源于T細(xì)胞）、趨化因子（C-C基序）13（CCL13）、其他趨化因子和血清透明質(zhì)酸的濃度升高。此外，炎癥內(nèi)型與“局部”或“滑膜”炎癥的標(biāo)志物相關(guān)，包括C3M、C1M（組織膠原轉(zhuǎn)換的標(biāo)志物）、滑液來源的透明質(zhì)酸和內(nèi)皮抑素，后者是與干燥（Sjo¨gren’s）綜合征、系統(tǒng)性硬化，膠原性關(guān)節(jié)炎和佐劑性關(guān)節(jié)炎有關(guān)的血管生成標(biāo)志物。內(nèi)皮抑素是一種血管生成抑制劑，它干擾生長因子如堿性成纖維細(xì)胞生長因子（bFGF/FGF-2）和血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）的促血管生成作用。

骨內(nèi)型的分子標(biāo)記物（骨重建及骨刺）

骨胳由生成和吸收而組成的骨周轉(zhuǎn)過程和骨關(guān)節(jié)炎之間的關(guān)系已在骨關(guān)節(jié)炎領(lǐng)域得到證實(shí)，近年來受到了廣泛關(guān)注，尤其是在生物化學(xué)標(biāo)志物方面。這種關(guān)系取決于疾病的階段和起源。骨效應(yīng)與關(guān)節(jié)軟骨層下的變化是分離的。此外，骨-軟骨之間的相互作用影響這些組織間的生物標(biāo)記物、生物化學(xué)過程、生物化學(xué)和生物力學(xué)信號(hào)，在骨關(guān)節(jié)炎疾病進(jìn)展中至關(guān)重要。骨贅的發(fā)育對(duì)疾病后期疼痛的發(fā)展也很重要。骨贅本身并不疼痛，但它們是其他疼痛來源的標(biāo)志物，因?yàn)樗鼈兪前l(fā)展成為骨關(guān)節(jié)炎的標(biāo)記，它們可能是疼痛管理和延緩疾病進(jìn)展的重要靶點(diǎn)。骨重建是一個(gè)動(dòng)態(tài)過程，破骨細(xì)胞的骨吸收過程與成骨細(xì)胞形成的足夠數(shù)量的新骨形成相平衡。軟骨下骨區(qū)域的結(jié)構(gòu)和分子變化與血管增加、骨髓損傷和微小骨裂增加有關(guān)，所有這些都導(dǎo)致骨重建和組織的周轉(zhuǎn)。

有幾種生物標(biāo)記物可用于測(cè)量骨基質(zhì)組織周轉(zhuǎn)率。在骨吸收過程中，I型膠原C末端末端肽（CTX-I）反映了破骨細(xì)胞分泌的半胱氨酸蛋白酶組織蛋白酶K對(duì)I型膠原的降解。CTX-I也以與年輕骨的轉(zhuǎn)換有關(guān)的α異構(gòu)形式存在。在對(duì)有癥狀和放射學(xué)表現(xiàn)的骨關(guān)節(jié)炎患者的縱向研究中，α-CTX與骨顯像測(cè)量的軟骨下骨轉(zhuǎn)換增加相關(guān)，并與基于骨贅評(píng)分和JSN的骨關(guān)節(jié)炎進(jìn)展相關(guān)。有人提出，針對(duì)骨關(guān)節(jié)炎的新的藥理學(xué)和生物學(xué)治療應(yīng)包括靶向骨-軟骨界面和可測(cè)量該界面動(dòng)態(tài)變化的生化標(biāo)記物，這將有助于骨關(guān)節(jié)炎藥物的開發(fā)。

代謝綜合征內(nèi)型的分子標(biāo)志物

骨關(guān)節(jié)炎已被證明與代謝綜合征（MetS）患病率的增加有關(guān)。代謝綜合征相關(guān)骨關(guān)節(jié)炎（MetS-OA）是骨關(guān)節(jié)炎的一個(gè)亞型，因?yàn)楣顷P(guān)節(jié)炎和代謝綜合征之間存在關(guān)聯(lián)。代謝綜合征表型有不同的定義方式，也因?yàn)楝F(xiàn)有數(shù)據(jù)集之間的差異。Francis Berenbaum將MetSOA定義為：“MetS OA的廣義定義是指年齡在45-65歲之間，患有全身性骨關(guān)節(jié)炎的患者，至少有一種代謝綜合征成分，即超重或肥胖。”雖然這是一個(gè)有用且重要的定義，但對(duì)這一定義還沒有普遍的共識(shí)。其他人將MetS-OA定義為患有糖尿病和肥胖的膝骨關(guān)節(jié)炎患者，而無需考慮高血。另一項(xiàng)對(duì)荷蘭膝關(guān)節(jié)骨關(guān)節(jié)炎患者的研究將骨關(guān)節(jié)炎分為5種，包括包括“肥胖表型”，這與MetS-OA相對(duì)應(yīng)。幾乎代謝綜合征的每一個(gè)組成部分都與骨關(guān)節(jié)炎的發(fā)病率和/或進(jìn)展有關(guān)，盡管研究結(jié)果有時(shí)相互矛盾。此外，單一代謝綜合征成分的相關(guān)性在關(guān)節(jié)間可能不同。

各種代謝因素包括脂質(zhì)毒性、胰島素抵抗、脂肪因子和全身低度炎癥等都可能參與骨關(guān)節(jié)炎的發(fā)病。代謝引發(fā)的炎癥，也稱為“變質(zhì)炎癥”（佳學(xué)基因建議譯為“代謝炎癥”），是炎癥的一個(gè)亞類，由代謝疾病相關(guān)的因素引發(fā)，可能是與代謝過剩相關(guān)的疾病的結(jié)果，由許多與經(jīng)典炎癥有關(guān)的類似分子和信號(hào)通路參與。脂質(zhì)、細(xì)胞因子、脂肪因子和維生素D引起的代謝炎癥與骨關(guān)節(jié)炎的發(fā)病機(jī)制有關(guān)。超重和肥胖的骨關(guān)節(jié)炎患者脂肪組織的增加導(dǎo)致循環(huán)脂肪因子水平的增加，這可能對(duì)關(guān)節(jié)退化有直接作用。與對(duì)照組相比，骨關(guān)節(jié)炎患者血漿或滑液中的脂肪因子瘦素、抵抗素、內(nèi)脂素和脂聯(lián)素的濃度更高。高血糖相關(guān)的晚期糖基化終產(chǎn)物（AGEs）在肌肉和結(jié)締組織中積聚，并與靶蛋白交叉連接。膠原的非酶糖基化導(dǎo)致軟骨和ECM的病理性硬化。研究發(fā)現(xiàn)，晚期糖基化終產(chǎn)物戊糖苷存在于骨關(guān)節(jié)炎患者的滑液、血清和軟骨中。

一個(gè)研究代謝綜合征表型骨關(guān)節(jié)炎的創(chuàng)新方法是組學(xué)技術(shù)，如代謝組學(xué)。一項(xiàng)研究確定了三個(gè)代謝上不同的亞類，即膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎的內(nèi)型在滑液中的酰膽堿、甘油磷脂、鞘脂和一種生物胺水平不同[76]。該研究確定的亞型與骨關(guān)節(jié)炎的經(jīng)典危險(xiǎn)因素（如性別、年齡）或代謝綜合征的組成部分（如高血壓、糖尿病）并不一致。此外，這些發(fā)現(xiàn)的潛在臨床意義仍有待確定。
 

衰老型年齡相關(guān)內(nèi)型的分子標(biāo)志物

眾所周知，哺乳動(dòng)物的壽命和膠原蛋白的老化率之間存在著相反的關(guān)系。膠原蛋白的老化率表現(xiàn)為富含膠原蛋白的組織如動(dòng)脈、肺和關(guān)節(jié)軟骨的硬度逐漸增加。在衰老過程中，細(xì)胞外基質(zhì)的特點(diǎn)是溶解度和蛋白水解消化率降低。已經(jīng)證實(shí)了人類ECM中與年齡相關(guān)的戊糖苷積累。在賊近的一項(xiàng)研究中，豚鼠年齡相關(guān)性骨關(guān)節(jié)炎的嚴(yán)重程度與糖基化、氧化和硝化氨基酸水平顯著升高有關(guān)。此外，在骨關(guān)節(jié)炎動(dòng)物模型和骨關(guān)節(jié)炎患者樣本中，葡糖交聯(lián)和二酪氨酸隨著年齡和疾病進(jìn)展而逐漸增加。葡糖交聯(lián)是衰老ECM的主要交聯(lián)形式，它改變了糖尿病患者的膠原，造成年齡相關(guān)的激素變化。此外，衰老細(xì)胞分泌細(xì)胞因子的改變影響免疫系統(tǒng)及其對(duì)于關(guān)節(jié)組織損傷的反應(yīng)，以及這些細(xì)胞與局部組織環(huán)境之間的相互作用。這些數(shù)據(jù)還強(qiáng)調(diào)了衰老性骨關(guān)節(jié)炎內(nèi)型與其他內(nèi)型的可能存在的交叉，包括前面討論的代謝和炎癥內(nèi)型。
 

骨關(guān)節(jié)炎分子內(nèi)型的總結(jié)

骨關(guān)節(jié)炎是一種多病因的異質(zhì)性疾病，具有相應(yīng)的分子內(nèi)型和臨床表型。為了促進(jìn)骨關(guān)節(jié)炎領(lǐng)域的發(fā)展，需要明確不同分子內(nèi)型的定義不同表型的含義，避免發(fā)表文獻(xiàn)時(shí)混淆它們。還需要開發(fā)新的生物標(biāo)志物工具，用來對(duì)病人進(jìn)行分類。這些工作可以為開發(fā)和制定有效的預(yù)防和治療策略鋪平道路。結(jié)合臨床數(shù)據(jù)、影像學(xué)結(jié)果和精心挑選的生化標(biāo)志物，有助于推進(jìn)患者分類，更好的設(shè)計(jì)臨床試驗(yàn)，更為個(gè)性化和更為效的骨關(guān)節(jié)炎的治療。

2010年，van Spil等人發(fā)表了一篇系統(tǒng)綜述，其結(jié)論是目前的生化標(biāo)志物沒有一個(gè)具有足夠的鑒別能力來幫助個(gè)體或有限數(shù)量的患者診斷和預(yù)測(cè)骨關(guān)節(jié)炎，仍然需要尋找并開發(fā)骨關(guān)節(jié)炎的生化標(biāo)志物使藥物開發(fā)和轉(zhuǎn)化研究成為可能。

賊近的研究主要集中在檢測(cè)組織更新和/或炎癥的生化標(biāo)志物是否能區(qū)分能夠?qū)⒉煌愋偷墓顷P(guān)節(jié)炎患者與健康患者區(qū)分開來，是否與某一類型的骨關(guān)節(jié)炎癥狀和體征有關(guān)，和/或是否與疾病進(jìn)展有關(guān)。然而，要在這一領(lǐng)域取得進(jìn)展，還需要采取若干步驟。首先，該領(lǐng)域應(yīng)該轉(zhuǎn)向在分子水平出現(xiàn)放射學(xué)征狀前或早期放射學(xué)征狀出現(xiàn)早期的階段研究。因?yàn)樵诩膊≡缙?，在所有表型結(jié)合成賊終共同途徑之前，區(qū)分分子內(nèi)型和相應(yīng)臨床表型的能力可能更容易。第二，生物化學(xué)標(biāo)記物實(shí)際上應(yīng)該被用來區(qū)分骨關(guān)節(jié)炎患者亞型的能力，而不僅僅是在群體水平或與健康對(duì)照組比較時(shí)與疾病參數(shù)的相關(guān)性。第三，新技術(shù)（如組學(xué)技術(shù)）可能對(duì)骨關(guān)節(jié)炎表型研究特別有用，因?yàn)樗鼈冊(cè)u(píng)估的是一組標(biāo)記物，而不是一個(gè)或幾個(gè)。第四，可以假設(shè)局部生化標(biāo)記物（如滑液）可能更好地區(qū)分分子內(nèi)型，因?yàn)橄到y(tǒng)性因素（包括共?。┑母蓴_較少。

總之，骨關(guān)節(jié)炎內(nèi)型和表型研究對(duì)對(duì)設(shè)計(jì)有效的、分層的骨關(guān)節(jié)炎治療以及對(duì)抗骨關(guān)節(jié)炎對(duì)全世界個(gè)人和社會(huì)造成的負(fù)擔(dān)具有重要意義。