【佳學基因檢測】女孩大了，沒有月經(jīng)，遺傳嗎？如何做基因檢測？

案例介紹：

來自湖南的徐半夏（化名），女，就診時年齡為16歲 ，因為不來月經(jīng)，而到佳學基因合作醫(yī)療機構就診。經(jīng)醫(yī)生問診，書寫病例如下：患者***，16歲，社會性別"女性"，因"原發(fā)性閉經(jīng)"于2020年9月就診本院。患者足月順產(chǎn)，出生時外生殖器呈女性特征，按女孩撫養(yǎng)，智力發(fā)育正常，身高、體重與同齡人相似。13歲時聲音變粗，出現(xiàn)喉結，并有陰毛、腋毛、陰莖生長，無晨勃，無遺精，未予重視及治療。至16歲仍無月經(jīng)初潮，遂就診本院。父母為近親婚姻(表兄妹關系)，有一妹。體格檢查：血壓143/62 mmHg(1 mmHg＝0.133 kPa)，身高158 cm，體重44.3 kg，體重指數(shù)(BMI)17.40 kg/m²。神清，精神可，女性外貌，可見喉結，聲音較粗，腋毛稀疏，雙側乳房Tanner分期1期。心肺腹無殊，雙下肢未見異常。外陰可見陰毛，小陰莖，長3.5 cm，直徑2.0 cm。尿道口與陰道口分開，陰道呈7.0 cm盲管，直徑2.0 cm。雙側腹股溝可捫及睪丸。

基因檢測方法：

1)臨床檢查：血、尿、糞三大常規(guī)，肝腎功能，血脂，血清電解質(zhì)及24 h尿電解質(zhì)，甲狀腺功能，促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)，血、尿皮質(zhì)醇，性激素全套，hCG興奮試驗，心電圖，胸片，骨齡片，腎上腺CT，子宮及雙附件超聲，睪丸超聲，染色體核型分析等。

2)基因檢測：抽取患者徐半夏及其父母外周EDTA抗凝血3 ml，送交佳學基因進行致病基因鑒定基因解碼基因檢測。

3)生物信息學預測：Mutation Taster(http：//www.mutationtaster.org/)用于預測發(fā)現(xiàn)的新突變是否致病，Clustal Omega(http：//www.ebi.ac.uk/Tools/msa/clustalo/)用于突變位點的保守性分析。

分析結果：

實驗室檢查：

半夏三大常規(guī)、肝腎功能、血脂、電解質(zhì)、甲狀腺功能、皮質(zhì)醇節(jié)律和ACTH均正常。性激素測定結果及hCG興奮試驗結果見表1。心電圖、胸片、腎上腺CT未見異常。左手及腕關節(jié)正側位片顯示骨齡與實際年齡相符。婦科超聲盆腔內(nèi)未探及明顯子宮卵巢樣回聲?；颊卟G丸超聲顯示雙側腹股溝區(qū)睪丸樣回聲，右側腹股溝內(nèi)睪丸大小約35 mm×19 mm×23 mm，左側腹股溝內(nèi)睪丸大小約38 mm×19 mm×24 mm。染色體核型均為46，XY。

據(jù)臨床檢查結果，可判斷徐半夏為男性假兩性畸形，但造成男性假兩性畸形的原因多樣，睪酮生成障礙或作用障礙均可造成男性假兩性畸形。根據(jù)性激素檢查結果，患者呈現(xiàn)高AD、低睪酮的特點，提示AD向睪酮轉化障礙可能；徐半夏的睪酮沒有被明顯興奮，睪酮/AD<0.8，進一步提示AD向睪酮轉化障礙，即17β-HSD3缺陷癥，故進一步檢測HSD17B3基因以明確診斷。

基因檢測：

因檢測發(fā)現(xiàn)徐半夏的HSD17B3基因第11號外顯子均存在c.852G>A純合突變，導致第284位色氨酸突變成終止密碼子(p.W284X)。父母基因測序結果顯示亦存在該突變位點，但都為雜合狀態(tài)。

因解碼分析：

utation taster預測該突變位點為致病性的，因為該突變可以導致蛋白質(zhì)缺失27個氨基酸，同時可能導致無義突變介導的mRNA降解(nonsense-mediated mRNA decay，NMD)。多物種比對提示284號色氨酸及羧基端另外26個氨基酸均較保守。

基因檢測及臨床分析結論：

者徐半夏罹患的為17β-羥類固醇脫氫酶3型缺陷癥。 這是一種罕見病、遺傳病。

17β-羥基類固醇脫氫酶缺陷癥介紹

類17β-羥類固醇脫氫酶3型(17β-hydroxysteroid dehydrogenase 3, 17β-HSD3)主要在睪丸中表達，利用NADPH作為輔因子催化雄烯二酮(androstenedione，AD)轉化為睪酮(testosterone)，對于胚胎期男性外生殖器的形成至關重要。1971年Saez等新穎報道確認17β-HSD3缺陷癥可以引起46，XY性發(fā)育異常疾病(46，XY disorders of sex development)，1994年Geissler等新穎確認17β-HSD3缺陷癥的致病基因為HSD17B3。

SD17B3基因位于染色體9q22區(qū)，包含11個外顯子。17β-HSD3缺陷癥作為一種常染色體隱性遺傳病，HSD17B3基因的純合突變或復合雜合突變均可致病。HSD17B3基因突變的46，XX個體表型基本正常。HSD17B3基因突變的46，XY患者的臨床表現(xiàn)取決于17β-HSD3的殘余酶活性，典型表現(xiàn)是一個46，XY個體擁有睪丸、附睪、輸精管、生精管及射精管，外生殖器卻模棱兩可或有效是女性表型，可伴有陰蒂肥大、陰囊融合或陰道盲端。這些患者出生時常常被當做女性撫養(yǎng)，到青春期時，血清睪酮可上升至正常范圍低限，導致患者出現(xiàn)進行性的男性化。該病的診斷主要依據(jù)血清上升的AD水平及下降或正常范圍低限的睪酮水平，絨毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin, hCG)興奮試驗有助于協(xié)助診斷，hCG興奮后睪酮/AD<0.8高度提示17β-HSD3缺陷癥，基因檢測可進一步明確診斷。本案例報道HSD17B3基因一個新的無義突變導致一對姐妹男性假兩性畸形。

佳學基因檢測科普

胎期男性表型的形成主要依賴于胎兒睪丸分泌的2種激素：米勒氏管抑制激素(mullerian inhibiting hormone)和睪酮，前者介導米勒氏管結構的退化，后者負責男性泌尿生殖道及男性外生殖器的形成。一旦睪酮合成缺陷或作用障礙，將導致男性外生殖器模糊，即男性假兩性畸形。睪酮作用障礙是男性假兩性畸形賊常見的原因，包括雄激素受體基因(androgen receptor，AR)突變導致的雄激素不敏感綜合征及5α-還原酶基因(5α-reductase 2，SRD5A2)突變導致的5α-還原酶缺陷癥。睪酮合成缺陷常是由于腎上腺皮質(zhì)類固醇激素合成過程中的酶缺陷導致膽固醇向雄激素轉化障礙，這些酶包括膽固醇側鏈裂解酶、3β-羥類固醇脫氫酶II型、17α-羥化酶/17，20-裂解酶及17β-HSD3，其中17β-HSD3缺陷癥賊為常見，但其具體發(fā)病率不詳，荷蘭一項研究顯示其新生兒17β-HSD3缺陷癥發(fā)病率為1∶14700，雜合攜帶率為1∶135。17β-HSD3缺陷癥的特征性臨床表現(xiàn)是46，XY個體出生時內(nèi)生殖器為睪丸，外生殖器呈女性表型，故常常被誤認為女性撫養(yǎng)，青春期時卻出現(xiàn)進行性男性化，因此該病在兒童期易與有效性雄激素不敏感綜合征(Complete androgen insensitivity syndrome，CAIS)混淆，青春期易與5α-還原酶缺陷癥混淆。一項研究顯示17β-HSD3缺陷癥在疾病早期被誤診為AIS的錯誤率高達67%，因此臨床醫(yī)生需仔細鑒別，必要時可進行基因檢測明確診斷。

女孩呈現(xiàn)現(xiàn)部分男性特征的致病基因鑒定基因解碼

1994年Geissler等^]新穎確認17β-HSD3缺陷癥的致病基因為HSD17B3以來，至今已有47個突變被報道，包括錯義/無義突變、剪接突變、復制突變、插入、刪失突變等，大多數(shù)病例為阿拉伯人、高加索人，中國人在數(shù)據(jù)庫中只有一例，這是因為很多患者產(chǎn)沒有采用基因檢測技術進行分析的原因。在本例家系中，致病基因鑒定基因解碼發(fā)現(xiàn)了一個的純合無義突變(p.W284X, c．852G>A)導致患者徐半夏患17β-HSD3缺陷癥，父母為相應的雜合攜帶者，表型正常，有效符合17β-HSD3缺陷癥的遺傳規(guī)律。雖然案例沒有進行功能學驗證，但Mutation taster預測該位點為致病突變，多物種序列比對亦提示該位點氨基酸較為保守，結合家系信息、臨床癥狀及該突變的性質(zhì)(無義突變)，基因檢測根據(jù)美國醫(yī)學遺傳學和基因組學學院(American College of Medical Genetics and Genomics, ACMG)制定的DNA序列變異理解標準^]判定該新突變?yōu)橹虏⊥蛔儭?/p>

多數(shù)被當作女孩撫養(yǎng)的17β-HSD3缺陷癥患者，如果性腺未被摘除，會出現(xiàn)進行性的男性化，因此如果選擇繼續(xù)當女性，建議摘除睪丸，然后進行雌激素替代維持女性性征。如果選擇當男性，除了必要的手術治療隱睪外，一般不需治療即可在青春期得到充分的男性化發(fā)育。研究顯示，17β-HSD3缺陷癥男性患者成年后用雄激素治療并無額外獲益^]。但據(jù)報道17β-HSD3缺陷癥患者的生殖細胞惡變率高達28%，因此DSD管理共識建議對于保留睪丸的患者要密切監(jiān)視其惡變的可能。對于性別的選擇，臨床醫(yī)生需與患者及其家屬進行充分的溝通，必要時對患者進行心理測試評估，尊重患者及其家屬的意愿做出選擇。在本案例中，徐半夏選擇繼續(xù)當女性，因此于2015年2月行腹腔鏡下雙側性腺摘除術，術后病理診斷："雙側睪丸組織伴間質(zhì)細胞增生" ?；颊呤中g結束后便開始予以雌激素替代治療，女性性征發(fā)育良好，至2015年10月復診時Tanner分期為P4B3。

本文分享一個17β-HSD3缺陷癥家系病例，詳細總結其臨床特征，并通過基因分析發(fā)現(xiàn)了致病性基因檢測突變突變位點。17β-HSD3缺陷癥較為罕見，容易誤診，需臨床醫(yī)生提高認識，除了臨床表現(xiàn)及生化檢查，可進行基因檢測幫助明確診斷。